高效液相色谱分析ppt(共23张PPT).pptx

高效液相色谱分析ppt;基本概念与特点

;液相色谱流程与原理;色谱图及相关名词;（二）柱效能

色谱柱在色谱分离中由动力学因素所决定的柱效能，通常用塔板高度或塔板数表示。

塔板数：

塔板高度：;使用极性化合物的分离。

特点：分离效率高、分析速度快、应用范围广、操作自动化。

适用非极性化合物的分离。

（二）高压输液系统（高压泵）

3、试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀并在柱中沉积。

每种物质具有不同的折光指数。

每种物质具有不同的折光指数。

tR(2),tR(1):组分2和组分1的保留时间

（二）、示差折光检测器—通用型检测器

以下为几种常用的微粒类型：

（一）、紫外检测器—应用最广泛的检测器

使用极性化合物的分离。

当使用紫外检测器时，流动相不应有紫外吸收。

（一）色谱流出曲线—色谱图

高效液相色谱的柱填料有离子交换树脂、凝胶，较多的使用硅胶微粒作为担体。

(a)可变波长紫外检测器;

完全分离;

高效液相色谱系统;（二）高压输液系统（高压泵）

;;（三）色谱柱;2.色谱柱;若样品溶于极性温和溶剂中，如醇类，则可选择极性固定相，也可以选择非极性固定相。

固定相极性流动相极性

每种物质具有不同的折光指数。

基本原理：在一定的条件下，荧光强度与流动相中的组分的浓度成之比。

如果溶质溶于烃类溶剂，表明是低极性化合物，这样就可以选择非极性或亚极性固定相。

酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。

tR(2),tR(1):组分2和组分1的保留时间

（一）、紫外检测器—应用最广泛的检测器

流动相选择受一定限制。

使用极性化合物的分离。

(2)表层多孔型担体（薄壳型微珠担体）：

组分极性越大，保留时间越长；

以下为几种常用的微粒类型：

一支稳定、高效的色谱柱对建立适用性强、重现性好的分析方法是必不可少的。

每种物质具有不同的折光指数。

它是直径为30～40μm的实心核(玻璃微珠)，优点是：孔穴浅（固定相仅为表面的一薄层），传质速度快，易于填充均匀，柱效高。;4.流动相;正相液相色谱

（正相柱）;选择流动相时应注意的问题;3、试样在流???相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀并在柱中沉积。;（四）检测器;(a)可变波长紫外检测器;（二）、示差折光检测器—通用型检测器

;缺点：

灵敏度低；

对温度敏感；

不能用于梯度洗脱。;（三）、荧光检测器—专用型检测器

;特点：

高灵敏度；

高选择性；

可用于梯度洗脱。