甜瓜主要病害抗性鉴定与评价技术规程 第3部分：甜瓜炭疽病抗性鉴定与评价技术规程-送审讨论稿OK2.docx

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T/ZJSIAXXXXX—2024甜瓜主要病害抗性鉴定评价技术规程

第1部分：甜瓜炭疽病抗性鉴定评价技术规程

1范围

本文件规定了甜瓜品种对甜瓜枯萎病、甜瓜根腐病、甜瓜蔓枯病、甜瓜炭疽病、甜瓜白粉病、甜瓜霜霉病抗病性鉴定评价的术语和定义、抗病性鉴定方法、病情调查和抗病性评价。

本文件适用于各种甜瓜（包括甜瓜（CucumismeloL.）种下2个亚种和16个变种，以及育种种质资源和品系）对甜瓜枯萎病、甜瓜根腐病、甜瓜蔓枯病、甜瓜炭疽病、甜瓜白粉病、甜瓜霜霉病的抗病性鉴定与和抗病性结果评定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB16715瓜菜作物种子第1部分瓜类NY/T2118蔬菜育苗基质

3术语和定义

下列术语和定义适用于本规程。3.1

抗病性diseaseresistance

植物所具有的能够克服或减轻病原物致病作用的可遗传性状。3.2

抗性评价resistanceevaluation

根据采用的技术标准判别植物对特定病害反应程度和抵抗水平的描述。3.3

致病性pathogenicity

病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力。3.4

病情级别diseaserating

人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述。3.5

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病原分离物pathogenisolate

采用人工方法从植物发病部位分离获得的、在特定环境条件下培养的病原物。3.6

接种体inoculum

用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分。3.7

接种液inoculumsuspension

用于接种的、含有接种体的悬浮液。3.8

发病率rateofinfected

发病甜瓜植株数占总甜瓜植株数的百分率。3.9

病情指数diseaseindex(DI)

通过对植物个体发病程度（病情级别）数值的计算获得的群体发病程度的数值化描述形式，是描述发病严重度的综合指标。

4抗病性鉴定方法

4.1基本设备

无菌室、恒温箱培箱、恒温振荡箱培养、超净工作台、高压灭菌锅、冰箱、可控温的温室（温度保持在20℃~30℃)、塑料盆、铝锅、电炉、培养皿、试管、剪刀、镊子、广口瓶、酒精灯、滤纸、三角瓶、各种培养基等。

4.2接种体分离

以PDA培养基，采用常规组织分离法，从甜瓜炭疽病的发病植株的发病部位，分离病原物，采用单孢分离纯化。分离物经形态学和分子生物学鉴定，以及致病性测定，确认为甜瓜炭疽病菌（Colletotrichumorbiculare(Berk.＆Mont.)Arx.），见附录B。。

4.3接种体确定

选择分布较广、致病力较强的病原菌优势菌株作为人工接种鉴定使用的接种体。

4.4接种体保存

4.4.1短期保存

将甜瓜炭疽病菌接种于PDA斜面，在25℃~28℃培养7d后，置4℃~8℃的冰箱中保存。

4.4.2长期保存

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将甜瓜炭疽病菌接种于PDA平板培养基上，并在接种点周围放置一定数量的灭菌滤纸片，在25℃~28℃培养7d后，取出滤纸片，经真空干燥后于-20℃~-80℃的低温冰箱中保存。

4.5接种体悬浮液制备

将保存的人工接种鉴定使用的甜瓜炭疽病菌接种体移植于PDA平板培养基上，在25℃~28℃培养7d进行活化。在无菌操作下，甜瓜炭疽病菌接种体接种于PDA平板培养基上，置于25℃~28℃恒温培养箱中培养7d～10d，用灭菌蒸馏水洗下分生孢子，并制成接种体悬浮液，供人工接种使用。

5鉴定甜瓜苗培育

5.1种子质量

应符合GB16715的要求。

5.2浸种催芽

将待鉴定甜瓜的种子经5%次氯酸钠溶液浸种10min，用清水冲洗3次，再用清水浸泡5h后，置于30℃~32℃恒温箱中保湿催芽。

5.3播种

露白发芽后播植于温室，采用营养钵盆栽法进行育苗，基质应符合NY/T2118的要求。将蔬菜育苗基质装入新的直径11cm～13cm、高10cm～13cm的塑料营养钵中，至2/3高度，排列整齐，播种前先用自来水浇透育苗基质，随后将已催芽的待鉴定甜瓜种子播于上述塑料营养钵中，每钵1粒种子，然后用泥炭育苗基质覆盖，以盖住种子为宜。重复3次，每重复30钵，共90钵，待用。

5.4对照品种

抗病性鉴定时，鉴定中设置一个感病对照品种，感病对照不得缺省。感病对照宜选用本地区的常规感病品种，感病对照品种选择标准为在常规接菌量下病情指数大于50