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槲寄生抗肿瘤作用研究

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摘要槲寄生提取物作为天然的抗癌药物在欧洲被应用已有几十年，近几年来人们发现其抗肿瘤活性成分主要是槲寄生凝集素、毒肽、生物碱，本文就其抗肿瘤作用做一综述。

论文关键词：槲寄生,凝集素,毒肽,生物碱,抗肿瘤作用

槲寄生（Viscumcoloratum(Kom.)Nakai）为桑寄生科槲寄生属植物，是一种半寄生植物，常寄生于榆树、槲树等树上，其茎、叶入药。槲寄生化学成份主要包括三萜类、黄酮类、多糖、植物凝集素、槲寄生毒素、生物碱等。传统医学认为槲寄生有祛风湿，补肝肾，强筋骨，养血、安胎等功效，中医用来治疗风湿痹痛，腰膝酸软，胎动不安等症状[1,2]。近年来，有关槲寄生抗肿瘤作用的报道增多，其抗肿瘤活性成分主要为植物凝集素、槲寄生毒肽、生物碱。本文就植物凝集素、槲寄生毒肽、生物碱抗肿瘤作用的研究进行综述。

1凝集素的抗肿瘤作用

槲寄生凝集素（mistletoelectin,ML）是一种糖蛋白，能够识别细胞膜表面糖蛋白的糖链，由A链和B链两个亚基组成。它的B链与细胞表面受体末端的半乳糖结合，然后经细胞的二硫键裂解系统,将A链释放,经胞饮作用使A链进入细胞内,A链与60S核糖体亚基中的28SRNA结合,并断裂糖苷键,使60S核糖体不能与延伸因子EF-2反应,致使蛋白质合成停止,细胞死亡[3]。

1.1凝集素种类及特性

目前从欧洲槲寄生中分离得到三种植物凝集素(ML)，ML-Ⅰ，ML-Ⅱ，ML-Ⅲ。三类ML具有同源的氨基酸序列。Blonski等[4]发现ML与恶性肿瘤细胞表面的糖配体结合率高达92.5%，因而其亦可作为其他抗肿瘤药物的靶向性运载工具。

1.2凝集素抗肿瘤机制

1.2.1抑制肿瘤细胞增殖Kovacs等[5]发现ML可以抑制骨髓瘤细胞RPMI-8226增殖，其有效剂量范围为5-20ng/106/ml。傅炜昕等[6]研究ML对肿瘤细胞的细胞毒性作用，结果显示ML注射液影响细胞周期的作用环节是阻滞细胞周期中S期的细胞进入G2+M期,导致G1期细胞百分比下降,从而抑制肿瘤细胞增殖。

1.2.2诱导肿瘤细胞凋亡ML可诱导多种肿瘤细胞凋亡，Kim等[7]研究了ML对肝癌Hep3B细胞凋亡的作用，发现其是通过诱导产生活性氧（ROS）和下调线粒体膜电位使Hep3B细胞凋亡的。其中，SEK1/JNK1信号途径起了关键作用。ML-1（VAA-1）可通过Caspases途径诱导PLB-985和X-CGD细胞凋亡，细胞学检测出现明显DNA“梯状带”，并发现细胞骨架蛋白降解，核纤层蛋白B1是其作用的靶点[8]。

1.2.3免役调节作用Enesel等[9]给消化道肿瘤患者进行术前和术后ML治疗，与对照相比，发现ML能显著减弱手术引起的免役抑制作用，并能增加NK细胞、T细胞、B细胞的数量及补体、IgG、IgA、IgM的含量。Huber等[10]通过外周血单核细胞(PBMC)研究了ML对人体免役力的影响。结果发现PBMC和1类细胞因子如IFN-γ、TNF-γ，2类细胞因子IL-5、IL-3，单核巨噬细胞因子IL-1、TNF-α明显增多。

1.2.4影响肿瘤血管生成Elluru等[11]报道ML抗肿瘤的机制涉及肿瘤血管的生成。上皮细胞对肿瘤血管的形成具有重要的作用。YanHuyen等[12]研究了ML对人静脉内皮细胞和永生性人静脉内皮细胞的作用，发现ML能诱导这两种细胞凋亡。ML还能显著降低小鼠非何杰金淋巴瘤内毛细血管的数量，从而影响肿瘤生长[13]。

1.2.5抑制肿瘤复发ML用于表浅膀胱癌切除术后膀胱内灌注治疗，可降低膀胱癌的复发，且无明显的局部或全身性反应[14]。

1.2.6增强化疗药物的作用Bantel等[15]研究发现ML作为辅助治疗药物可以增强拓扑异构酶抑制剂依托扑沙的抗癌作用。

1.2.7抑制端粒酶活性ML能抑制人A253细胞端粒酶的活性，这也是其抗肿瘤机制之一[16]。Lyu等[17]检测了肝癌SK-hep-1和Hep3B细胞在ML作用后端粒酶的活性，结果显示ML以不依赖p53的方式抑制端粒酶的活性并呈时间相关性。

2槲寄生毒肽的抗肿瘤作用

槲寄生毒肽（viscotoxins，VT）是槲寄生中另一个重要的抗肿瘤活性成份，它们是一类相对分子量在5KDa左右的碱性多肽，含有46个氨基酸残基，富含半胱氨酸[18]。这类多肽对多种类型细胞都有毒性，包括动物、细菌和真菌[19]。

2.1槲寄生毒肽的种类和特性

槲寄生毒肽中已鉴定一级序列的有12种，来源于欧洲槲寄生的有6种：VTA1、A2、A3、B1、PS、U-PS；中国槲寄生中分离了6种：VTB2、B3、B4、B5、B7、B8，各种槲寄生毒肽一级序列高度保守[1]。槲寄生毒肽对多种肿瘤细胞具有细胞毒活性，毒肽分子通过破坏细