水环境监测仪器使用与维护.pptx

高效液相色谱仪的使用;高效液相色谱仪的使用;1、高效液相色谱分析法基本原理

高效液相色谱法是以液体作为流动相，借助于高压输液泵获得相对较高流速的液流以提高分离度，采用颗粒极细的高效固定相制成的色谱柱进行分离和分析的一种色谱分析方法。

;2、高效液相色谱仪的结构和使用

（1）Laballiance高效液相色谱仪的构造特点

高效液相色谱仪由检测器（实验中多采用紫外-可见检测器）、高压输液泵、色谱柱、柱箱、进样系统、电路系统、数据处理系统等部分组成。

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（2）Laballiance高效液相色谱仪的使用方法

①开启稳压电源，打开计算机。先打开高效液相色谱仪抽液泵电源，然后打开检测器，调节检测器波长为测量波长（丙酮紫外吸收波长为292nm），预热30min。

②调节流动相流速为1mL/min，打开泵开关，然后进入分析之星色谱工作站。在对话框中输入：用户名（DEMO）后按回车进入软件系统。软件系统包含：再处理、批处理、比较、配置、用户代码、采集1、采集2、采集3、采集4和退出共10个操作按钮。可根据分析需求选择不同的操作按钮。本试验做丙酮含量测定，选择采集1按钮，点击进入后可进行基线采集并观察基线是否在零点，如果基线不在零点可用检测器右侧的“ZERO”按钮进行调节。待基线稳定后，点击“STOP”按钮即可停止基线的采集。

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（2）Laballiance高效液相色谱仪的使用方法

③点击操作菜单中蓝色按钮“RUNsingle”进入样品测定对话框。输入样品名、调用分析方法和图谱保存路径后点击“启动”进入样品测定界面。

④用微量注射器吸取适量待测样品，旋开进样阀，将注射器的枕头扎入进样阀中，迅速将待测样品注入，快速关闭进样阀。待样品中所有组分的图谱测定完毕，点击“STOP”按钮，停止测定。

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（2）Laballiance高效液相色谱仪的使用方法

⑤测定结束后点击“Analyse”按钮，显示峰号，峰面积和保留时间等，点击“Rports”即可查看分析结果。

⑥所有实验结束后，退出工作站。

⑦用85%的甲醇水溶液冲洗色谱柱30min以上??

⑧停泵，先关闭检测器电源，然后待柱压降至50psi以下时，再关闭泵电源，最后关闭稳压电源。

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3、高效液相色谱仪附件的使用

（1）高压输液泵

高压输液泵是将流动相以稳定的流速或压力输送到色谱柱中。其稳定性直接影响到分析结果的重现性、紧密度和准确性，因此其流量变化通常是小于0.5%，同时因为色谱柱很细，填充颗粒很小，阻力很大，流动相流过色谱柱时产生很大的压力，所以高压输液泵通常能耐40~60MPa的高压。输液泵的种类很多，目前应用比较广泛的是并联式双柱塞泵和液压隔膜泵。

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3、高效液相色谱仪附件的使用

（2）进样器

进样器是将样品准确送入色谱柱的装置，要求密闭性好，似体积小，重复性好，进样引起色谱分离系统的压力和流量波动要很小。进样系统包括取样和进样两相功能，实现这两项功能又常用手动六通阀和自动进样两种。

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;谢谢!