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中华人民共和国医院消毒卫生标准GB15982——2012;一、采样和采样原则
1采样后尽快对样品进行相应指标的检测,送检时间不得超过4h;若样品保存于0--4℃时,送检时间不得超过24h。
2不推荐医院常规开展灭菌物品的无菌检查,当流行病学调查怀疑医院感染事件与灭菌物品有关时,进行相应物品的无菌检查。常规监督检查可不进行致病性微生物检测,涉及疑似医院感染暴发、医院感染暴发调查或工作中怀疑微生物污染时,应进行目标微生物的检测。;
3可使用经验证的现场快速检测仪器进行环境、物体表面等微生物污染情况和医疗器材清洁度的监督筛查;也可用于医院清洗效果检查和清洗程序的评价和验证。
;二、卫生标准值;(2)致病性微生物
不得检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等致病菌。
2医务人员手
卫生手消毒后医务人员手表面的菌落总数应≤10CFU/cm2
外科手消毒后医务人员手表面的菌落总数应≤5CFU/cm2.;2医疗器材
(1)进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品必须无菌。
(2)接触粘膜的医疗用品细菌总数≤20CFU/件(CFU/g或100cm2,,致病性微生物不得检出。;(3)接触皮肤的医疗用品细菌总数≤200CFU/件(CFU/g或100cm2,,致病性微生物不得检出。
3.消毒剂类卫生标准
(1)使用中消毒剂:细菌总数≤100CFU/ml,致病性微生物不得检出。
(2)灭菌用消毒液的菌落总数应为0CFU/ml.
(3)无菌器械保存液:必须无菌。;三、检测方法;要求:按操作说明书。
结果报告:
采样器各平皿菌落数之和(CFU)
空气细菌总数(cfu/m3)= ×1000
采样速率(L/min)×采样时间(min)
;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境采用平板暴露法。
A基本要点:平板直径9cm,采样高度80—150cm,边角距离1m,暴露时间(Ⅱ类环境暴露15min,Ⅲ、Ⅳ类环境暴露5min)。
B操作:室内面积≦30㎡,设内中外对角线3点,内、外点应距墙壁1m处;室内面积30㎡,东、西、南、北、中布5点采样,采样时将培养皿盖扣在培养皿口边缘,暴露一定时间后盖好送实验室置37℃培养48h作菌落计数,必要时分离致病性微生物。
;(3)结果报告:按平均每皿的菌落数报告:CFU/(皿.暴露时间)
2物体表面微生物污染检查方法
(1)采样时间:潜在污染区、污染区消毒后采样。清洁区根据现场情况确定。
(2)采样面积:被采面积≥100cm2,采样100cm2。被采面积100cm2,采全部表面。;)采样方法:用5cm×5cm灭菌规格板放在物体表面,用浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液或N.S的棉拭子各1根在格子内横竖往返涂抹5次,并随之转动棉拭子,连续采样1--4个规格板面积,剪去手接触部分,将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内送检。若采样物体表面有消毒剂残留时,采样液应含相应中和剂。;实验操作:将样品管充分混合后,用无菌吸管吸取不同稀释倍数的洗脱液1.0ml接种于灭菌培养皿中(共接种2只平皿,做平行样),加入熔化的450C灭菌营养琼脂15ml--20ml混合后,待其凝固,翻转平板置360C±10C培养48h作菌落计数。;(4)结果计算:
N×采样液稀释倍数
物体表面菌落总数(cfu/cm2)=
100
N——平均菌落数
×10——换算成10ml,即100cm2采样面积
÷100——面积换算成每cm2报告
小型物体表面的结果计算:Ncfu/件。;3医务人员手卫生检查方法;抹两次(一只手涂抹面积约30cm2),并随之转动棉签,剪去手接触部分,放入10ml采样液中送实验室检验(共60cm2面积)。采样面积按平方厘米(cm2)计算。若采样时手上有消毒剂残留,采样液应含相应中和剂。;操作:将样品管充分混合后,用无菌吸管吸取不同稀释倍数的洗脱液1.0ml接种于灭菌培养皿中(共接种2只平皿,做平行样),加入熔化的450C灭菌营养琼脂15ml混合后,待其凝固,翻转平板置370C培养48h作菌落计数。;(5)结果计算:
N×10
细菌总数(cfu/cm2)=
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