2株枯草芽胞杆菌防治农科1号香蕉枯萎病的田间试验.docx

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2株枯草芽胞杆菌防治农科1号香蕉枯萎病的田间试验

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论文导读:：香蕉枯萎病又名巴拿马病、黄叶病。其中生物防治的研究为近几年的热门方向。

论文关键词：香蕉枯萎病，生物防治，枯草芽胞杆菌，农科1号品系香蕉

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香蕉枯萎病又名巴拿马病、黄叶病，是由尖孢镰刀菌古巴专化型[Fusariumoxysporumf.sp.cubense(E.F.Smith)SnyderetHansen，简称FOC]侵染而引起维管束坏死的一种毁灭性真菌病害和典型的土传病害[1]。尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种引起的香蕉枯萎病在珠江三角洲、粤西等香蕉产区多个县市发生危害，蕉园病株率严重的超过90%，造成蕉园丢荒[2]。目前香蕉枯萎病的防治方法主要包括抗病育种防治、药剂防治、生物防治、农业措施防治等，其中生物防治的研究为近几年的热门方向，国内外有关香蕉枯萎病生物防治的研究主要集中在根际及土壤生防菌[3-6]、拮抗内生菌[7,8]和植物提取物[9,10]方面，涉及的微生物包括芽胞杆菌（Bacillusspp.）、假单胞菌（Pseudomonasspp.）、木霉菌（Trichodermaspp.）、放线菌（Actinomycetes）等。

农科1号香蕉品系是广东省广州市农业科学研究所以巴西蕉（MusaAAACavendishsubgroupcv.Brazil）为母本筛选出来的抗枯萎病新品系，在广州南沙万顷沙、番禺和中山等不同地区种植时发病率有差异，但总体抗性比巴西蕉强[11]。为了测试珠海市农业科学研究中心分离保藏的2株植物内生枯草芽胞杆菌R31菌株[12,13]和TR21菌株[14,15]与农科1号结合对香蕉枯萎病的防治效果药学论文，于2008年4月到2008年10月期间，在广东省珠海市斗门区枯萎病平均发病率达到50%以上的香蕉种植园设计R31菌株、TR21菌株单独灌根和混合灌根对农科1号香蕉枯萎病田间防效的试验。

1材料与方法

1.1供试菌株和植物

供试菌株：植物内生枯草芽胞杆菌（Bacillussubtilis）R31菌株和TR21菌株，由珠海市农业科学研究中心农业微生物学实验室分离和保藏中国。

供试植物：抗枯萎病香蕉新品系农科1号（MusaAAACavendishsubgroupcv.NongkeNo.1），为农户购买的由组培苗培育获得的无病新植种苗，2007年10月移栽到大田，2008年春节遭受冷害，并已发生香蕉枯萎病。

1.2菌株发酵

生防芽胞杆菌使用牛肉膏蛋白胨培养基[16]发酵，在500ml的锥形瓶中装入300ml培养基，按6%的接种量接入种子液，37℃，180r/m振荡培养72h。其中R31发酵液活菌数达到1.0×108cfu/ml，TR21发酵液活菌数达到7.47×107cfu/ml。

1.3试验设计

蕉园总面积26640m2，其中农科1号种植面积13320m2，巴西蕉种植面积13320m2。蕉园有10年连续种植巴西蕉的历史，香蕉枯萎病发病史6年，部分地块发病严重。试验前在发病严重的地块随机选取试验区和对照区，由于冷害造成的影响，无法准确判断枯萎病的初始发病率，试验开始时调查了初始总死亡率，计算公式为：初始总死亡率（%）=（冷害死亡株数+枯萎病死亡株数）/总调查株数×100%。

试验设计4组处理，清水对照、R31菌株灌根、TR21菌株灌根、TR21+R31（V︰V=1︰1）混合灌根药学论文，从2008年4月开始，每株农科1号蕉苗用2000ml上述菌株发酵液的40倍稀释液灌根，每月1次，最后一次灌根时间为2008年9月，共灌根6次。其中R31发酵液稀释40倍后菌体含量约2.5×106cfu/ml，TR21发酵液稀释40倍后的菌体含量约为1.86×106cfu/ml，TR21+R31（V:V=1:1）混合稀释40倍后的菌体总含量为2.18×106cfu/ml。

R31菌株处理区面积452.5m2，种植蕉苗93株，初始总死亡率为20.43%，试验开始时实际处理农科1号有效株数为74株；TR21菌株处理区面积454.6m2，种植蕉苗89株，初始总死亡率22.47%，试验开始时实际处理农科1号有效株数为69株；TR21+R31处理区面积480.5m2，种植蕉苗95株，初始总死亡率30.53%，试验开始时实际处理农科1号有效株数为65株；清水对照区面积568.1m2，种植蕉苗86株，初始总死亡率25.58%，试验开始时实际处理农科1号有效株数为64株。

1.4数据调查和统计分析

1.4.1发病率和防治效果分析去除试验前调查初始总死亡率基数，仅对存活的每株农科1号编号，此后每月调查一次药学论文，记录植株的生长情况、发病和死亡原因及时间，到2008年1