《高粱属品种鉴定 InDel分子标记法》.docxVIP

《高粱属品种鉴定 InDel分子标记法》.docx

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PAGE2

ICS

FORMTEXT65.020.10

CCS

FORMTEXTB05

FORMTEXT32

FORMTEXT江苏省地方标准

DBFORMTEXT32/TFORMTEXTXXXX—FORMTEXT2024

FORMTEXT?????

FORMTEXT高粱属品种鉴定InDel分子标记法

FORMTEXTIdentificationofSorghumMoenchusingInDelmarkermethod

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FORMTEXT2024-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX发布

FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX实施

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STYLEREF标准文件_文件编号DB32/TXXXX—2024

STYLEREF标准文件_文件编号DB32/TXXXX—2024

PAGE3

目次

TOC\o1-1\h\t标准文件_一级条标题,2,标准文件_二级条标题,3,标准文件_附录一级条标题,2,标准文件_附录二级条标题,3,前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4缩略语 1

5原理 2

6主要仪器设备及试剂 2

7溶液配制 2

8引物相关信息 2

9参照品种 2

10操作程序 2

11结果统计 6

12结果判定 6

附录A 7

附录B 9

附录C 11

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由江苏省农业科学院提出并归口。

本文件起草单位:江苏省农业科学院、中国农业科学院生物技术研究所、贵州省旱粮研究所。

本文件主要起草人:钟小仙、薛文韬、朱莉、高杰、刘智微、陈晓强。

高粱属品种鉴定InDel分子标记法

范围

本文件规定了利用核苷酸插入和缺失序列(InDel:Insert-delete)分子标记进行高粱属(SorghumMoench)品种DNA指纹鉴定的试验方法、数据采集、结果记录及判断标准。

本文件适用于高粱属酒用、粮用和饲用高粱、甜高粱、苏丹草、高丹草、拟高粱中的DNA分子数据采集和品种鉴定。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T3543.2农作物种子检验规程扦样

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

NY/T2594植物品种鉴定DNA分子标记法总则

术语和定义

NY/T2594界定的术语和定义适用于本文件。

缩略语

下列缩略语适用于本文件。

bp:basepair,碱基对。

CTAB:cetyltrimethylammoniumbromide,十六烷基三甲基溴化铵。

DNA:deoxyribonucleicacid,脱氧核糖核酸。

dNTPs:deoxyribonucleosidetriphosphate,脱氧核糖核苷三磷酸。

EDTA:ethylenediaminetetraaceticacid,乙二胺四乙酸。

PCR:polymerasechainreaction,聚合酶链式反应。

InDel:insertanddelete,插入和缺失序列。

SDS:sodiumdodecylsulfate,十二烷基硫酸钠。

Taq酶:Taq-DNApolymerase,耐热DNA聚合酶。

TAE:Tris-acetate-EDTA,三羟甲基氨基甲烷-乙酸-乙二胺四乙酸。

Tris:Tris(hydroxymethyl)methylaminomethaneTHAM,三羟甲基氨基甲烷。

TE:Tris-EDTA,三羟甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸。

TD-PCR:Touch-downPCR,降落PCR。

原理

不同高粱属品种由于遗传组成不同,在基因组DNA中某InDel位点存在大片段序列差异,这种差异可通过琼脂糖凝胶电泳或荧光毛细管电泳检测,从而对不同品种进行区分鉴定。

主要仪器设备及试剂

主要仪器设备及

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