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(完整版)免疫学质量控制流程--第1页

免疫学质量控制流程

【目的】

保证ELISA检测结果准确可*,充分发挥其方法学的优点。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下

述人员批准签字：专业主管、科主任。

【方法】

【分析前质控】

1.人员培训

实验是人操作的，因此检验人员需经过培训，熟练掌握本专业如下几方面

的技术知识：[1]检验项目的基本原理（ELISA原理）；

[2]临床意义；

[3]熟悉检测技巧，了解易出差错的环节及难点；

[4]熟悉检测试剂性能（包括试剂盒组成，包被片段及其组成）；

[5]熟悉检测仪器的原理及性能；掌握数据处理的能力和质量控制知识。

[6]某些特殊项目的检测如抗HIV等需经有关部门组织的专门培训班，考试

合格后持证上岗。【试剂盒选择】

卫生部规定乙肝试剂，丙肝试剂，必须使用经卫生部生物制品检定所检定

合格，并贴有防伪标签的产品。

【试剂盒评价】

试剂评价需要有权威的血清考核盘（Panel）进行检测，价格昂贵，操作繁

琐，一般实验室不易开展，可以通过以下信息，了解试剂质量。

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1.根据该试剂生物制品鉴定所的批批检定报告，了解其质量水平，按照质量

计划选择灵敏度高的或特异性高的试剂；

2.通过询问试剂包被物的组成，如原料来源（基因工程或合成多肽），片段

的组合（按比例混合或化学合成），片段的长短等判断试剂的优劣；

3.参考室间质评报告中对试剂的评价结果，了解不同试剂的质控成绩。

4.根据权威部门发布的试剂评价结果，了解市场上试剂的质量优劣。

【仪器质控】

为使仪器保持最佳工作状态应建立维护和校正仪器的标准操作程序

（SOP），所要控制的仪器包括移液器（加样枪），水浴箱（温箱），洗板机和

酶标仪。

1.移液器：ELISA加样量小（5-100ｕl），其准确性直接影响实验结果，利用

称重法检查：吸取刻度指示量的水，万分之一天平称重后计算吸量是否准确，

一般应在±10%以内；

2.水浴箱：经常检查水浴箱温度计所示的温度和水中（或温箱内）实测温度

是否一致，允许有±1℃的误差；

3.洗板机：每个厂家设置洗板后的残留液有各自的规定一般不超过2ul，人

工扣板时，垫纸不湿，定期检查管孔是否堵塞；

4.酶标仪：经常维护其光学部分，防止滤光片霉变，定期检测校正，使其保

持良好的工作性能。酶标仪的主要性能指标有：测读速度、读数的准确性、重

复性、精确度和可测范围、线性等等。优良的酶标仪的读数一般可精确到

0.001，准确性为±1%，重复性达0.5%。

酶标仪的可测范围视各酶标仪的性能而不同。普通的酶标仪在

0.000~2.000，新型号的酶标仪上限拓宽达2.900，甚至更高。超出可测上限的A

值常以或或其它符号表示。应注意可测范围与线性范围的不同，线性

范围常小于可测范围，比如某一酶标仪的可测范围为0.000~2.900，而其线性范

围仅0.000~2.000，这在定量ELISA中制作标准曲线时应予注意。

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【酶标仪校正程序】

1.滤光片波长精度检查：将不同波长的滤光片从酶标仪上卸下，用UV-2201

型紫外-可见分光光度计