丙肝抗体(Anti-HCV)实验操作规程(吉比爱).pdfVIP

丙肝抗体(Anti-HCV)实验操作规程(吉比爱)--第1页

丙肝抗体（Anti-HCV）实验操作规文件编码：PAFC-BXJY-SOP-LM04-03

程版本：1.3页码/总页：1/6

编写/日期：审核/日期：批准/日期：生效日期：

1.目的和适用范围：

1.1.为保证血液检测的结果正确性，规范实验操作，特制定本操作规程。

适用于本实验室，全体工作人员都必须严格按照本操作规程进行操作。

1.2.

2.术语：无。

3.职责：

3.1.实验室工作人员都必须严格按照本操作规程进行操作。

3.2.实验室负责人负责最终实验室报告的签发。

4.工作程序

4.1.操作说明

4.1.1.实验原理：

本试剂盒应用间接法酶联免疫法原理检测人血清或血浆中的HCV抗体。用高纯度基因重组HCV

抗原包被酶标板，待检血清或血浆中的-HCV抗体可与包被抗原反应，再与酶标抗人lgG抗体

结合，形成抗原-抗体-酶标抗体复合物。加底物（TMB）显色，在酶标仪上测定后根据吸光值

（A值）判定有无HCV抗体的存在。

4.1.2.检验方法：

准备：本试剂盒在使用前应在室温（18~25℃）平衡30分钟；包被板平衡至室温后才可打开

外包装铝箔袋，以防止板条吸收空气中水蒸气；将20倍浓缩洗涤液用纯化水20倍稀释后备

用。

设定：将待测样品按序排列设定加样顺序。每板试验设空白对照1孔（若用双波长检测，可

不设空白对照孔），阴性对照3孔，阳性对照2孔。

加样：将所需数量的板条固定于板架。在包被板孔中加入样品稀释液，每孔100ul。除空白

对照孔外，在相应孔中再加入HCV阴性、阳性对照和待检样品10ul。

温育第一次：贴上封口胶，置37℃温育60分钟。

洗涤：小心撕去封口胶。

手工洗操作：弃去各孔中液体、拍干。每孔注满洗液，静置5-10秒后弃尽，洗涤5次，拍干；

洗板机操作：没空加入350ul洗液，每次洗涤间隔5-10秒，洗涤5次，拍干。

加酶：除空白对照孔外，每孔加入HCV酶工作液100ul.

温育第二次：贴上封口胶，置37℃温育30分钟。

洗涤同操作5.

丙肝抗体(Anti-HCV)实验操作规程(吉比爱)--第1页

丙肝抗体(Anti-HCV)实验操作规程(吉比爱)--第2页

丙肝抗体（Anti-HCV）实验操作规文件编码：PAFC-BXJY-SOP-LM04-03

程版本：1.3页码/总页：2/6

显色：每孔加入底物液A50ul,再加入底物液B50ul，轻拍混匀，置37℃避光显色30分钟。

测定：

显色完毕后，每孔加入终止液50微升，轻拍混匀，立即在单波长450nm(须以空白对照孔调

零)或双波长（主波长450nm，参考波长600-650nm）下测定各孔A值。

4.2.参考值

质量控制：

阳性对照A值均值≥1.00，阴性对照A值均值≤0.10，则本次试验有效；否则，视为无效结果，

应重复试验。

临界值（Cutoff）计算：

临界值=0.15+阴性对照A值均值

若阴性对照A值均值小于0.03时，按照0.03计算，否则按照实际值计算。

结果判定：

阴性判定：样品A值＜临界值（Cutoff）为阴性；

阳性判定：样品A值≥临界值（Cutoff）为阳性。

检验结果的解释

大多数正常人群该项指标检测为阴性反应，如复试结果阳性则可能是HCV抗体阳性，应用确认

试验证实;

一些HCV感染患者HCV