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1
向日葵抗黑茎病水平室内鉴定技术规程
1范围
本文件规定了室内向日葵黑茎病抗性鉴定方法和抗病性评价标准。
2规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件。
3术语和定义
3.1
向日葵黑茎病Blackstemofsunflower
由黑茎病菌LeptosphaerialindquistiiFrezzi引起的向日葵真菌病害。
4向日葵黑茎病菌的培养
4.1接种菌株的选择
接种菌株选用内蒙古向日葵主栽区发病株上分离到的优势病原菌（Phomamacdonaldii）菌株。
4.2培养基的配制
PDA培养基：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂粉13g、用蒸馏水定容至1000mL。
4.3病原菌的培养
病原菌的培养方法参照DB34/T2784-2016，将保存在甘油中的黑茎病菌菌丝体接种在PDA平板上，置于20℃培养箱中培养。待菌落形成后，在菌落边缘打取直径为4mm菌丝块，接于新的PDA培养基中央进行活化培养。待菌落长到培养皿直径的80%时，打取菌落边缘的菌丝块用于接种。
5向日葵黑茎病抗性鉴定
5.1对照品种
以向日葵黑茎病抗性品种A132088和种A131023作为对照品种。
5.2向日葵的种植
2
将向日葵种子播种在装有无菌土的营养钵（直径15cm）中，每个品种播种5钵，每钵播种5粒，25±2℃,16h光照/8h黑暗条件下培养，待向日葵有4片真叶时开始进行茎杆接种。
5.3向日葵抗黑茎病水平鉴定
接种法参照DB34/T2784-2016，幼苗4片真叶时，在幼茎离地5cm处，用牙签划一伤口，取黑茎病菌菌落边缘菌块（约0.5cm）覆盖于伤口，用保鲜膜保湿，每个品种接种20株，以接种PDA培养基的作为对照。接种15d后测量茎秆上病斑长度。
5.4向日葵品种对黑茎病抗性的鉴定标准
根据被鉴定品种病斑长度评定品种的抗性级别，抗性级别的划分标准见下表。向日葵品种抗黑茎病级别的划分标准
抗病级别
抗病型
病斑长度（mm）
0
免疫
X=0
1
高抗
X≤15.00
3
中抗
15.00X≤30.00
5
中感
30.00X≤60.00
7
高感
X＞60.00
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