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食品安家标准

食品微生物学检验β型溶血性链球菌检验

1范围

本标准规定了食品中β型溶血性链球菌（Streptococcus）的检验方法。

本标准适用于食品中β型溶血性链球菌的检验。

2术语和定义

2.1β型溶血：在菌落周围形成完全透明的溶血环，红细胞完全溶解。

2.2β型溶血性链球菌：能够产生β型溶血的化脓（或A群）链球菌（Streptococcuspyogenes）和无乳

（或B群）链球菌（Streptococcusagalactiae）。

3设备和材料

除微生物常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：

a)恒温培养箱：36℃±1℃;

b)冰箱：2℃～5℃;

c)厌氧培养装置;

d)天平：感量0.1g;

e)均质器与配套均质袋;

f)显微镜：10×～100×;

g)无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头;

h)无菌锥形瓶：容量100mL、200mL、2000mL;

i)无菌培养皿：直径90mm;

j)pH计或pH比色管或精密pH试纸;

k)水浴装置：36℃±1℃;

l)微生物生化鉴定系统。

4培养基和试剂

4.1改良胰蛋白胨大豆肉汤（Modifiedtryptonesoybeanbroth,mTSB）：见附录A中A.1。

4.2哥伦比亚CNA血琼脂(ColumbiaCNAbloodagar)：见附录A中A.2。

4.3哥伦比亚血琼脂(Columbiabloodagar)：见附录A中A.3。

4.4革兰氏染色液：见附录A中A.4。

4.5胰蛋白胨大豆肉汤（Tryptonesoybeanbroth,TSB）：见附录A中A.5。

4.6草酸钾血浆：见附录A中A.6。

4.7无菌0.85%生理盐水。

4.80.25％氯化钙(CaCl2)溶液。

4.93％过氧化氢(HO)溶液。

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4.10生化鉴定试剂盒。

4.11生化鉴定卡。

5检验程序

溶血性链球菌检验程序见图1。

样品25g（或mL）+225mLmTSB

36℃±1℃18h~24h

划线接种哥伦比亚CNA血琼脂平板

36℃±1℃18h～24h，厌氧培养

挑取可疑菌落，接种哥伦比亚血琼脂平板和TSB

36℃±1℃18h～24h

革兰氏染色镜检/触酶试验

确定鉴定

链激酶试验(可选择)生化鉴定试剂盒或鉴定卡

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