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武汉市传染病防治所检验科龙一兵
?乙类传染病是指:病毒性肝炎、细菌性和阿米巴性痢疾、伤寒和副伤寒、艾滋病、淋病、梅毒、脊髓灰质炎、麻疹、百日咳、白喉、流行性脑脊髓膜炎、猩红热、流行性出血热、狂犬病、钩端螺旋体病、布鲁氏菌病、炭疽、流行性和地方性斑疹伤寒、流行性乙型脑炎、黑热病、疟疾、登革热。?丙类传染病是指:肺结核、血吸虫病、丝虫病、包虫病、麻风病、流行性感冒、流行性腮腺炎、风疹、新生儿破伤风、急性出血性结膜炎、除霍乱、痢疾、伤寒和副伤寒以外的感染性腹泻病。
?(一)疑似病人的取材疑似鼠疫病人应在服用抗茵药物前,依其症状和体征,按以下各型疑似鼠疫患者,除采取相应部位材料外,均应采取静脉血3~5mL,供栓菌和血清学诊断用。1、疑似腺鼠疫病人取材选取肿大之淋巴结,用碘酒、酒精局部消毒,以左手姆指、食指固定,用灭菌注射器(12~16号针头)刺入淋巴结,抽取组织液适淋巴结肿大不明显者,可先向淋巴结注射0.3~0.5mL灭菌生理盐水,
2、疑似肺鼠疫病人取材令病人对血琼脂平板咳嗽,或将带血痰液标本收集于灭菌平皿或用灭菌棉拭子涂擦咽部分泌物,将拭子保存于灭菌试管或灭菌生理盐水管内备检。6、疑似皮肤型鼠疫取材水泡、脓泡期,可将脓泡表面用酒精消毒,以灭菌注射器由泡的侧面刺入泡内,抽取内容物备检。溃疡、结痂期以灭菌镊子持灭菌棉球涂擦溃汤面和痂皮下的创面,将棉球保存于灭菌试管或灭菌盐水内备检。
以无菌手续采取肝、脾、肺、心血及有可疑病理改变的淋巴结等,分别置于灭菌平皿或试管内保存。尸体有腐败迹象时,必须取长骨材料。如不能解剖,可行局部取材,用腰椎穿刺器按淋巴结、心、肝、脾及肺的顺序穿刺采取组织,分别保存于灭菌试管内,尸体腐败时可穿刺取骨髓。
凡所取材料均应保存于灭菌器皿内;组织块可保存于灭菌生理盐水中,或用5~10mLBroke氏液保存;亦可应用CaryBleir培养基保存运送材料。容器用石蜡密封。3、指派二名人员(其中一名专业人员),乘快速交通工具送检材。4、接交材料时首先检查包装,绝对不能有破损、污染,如有破损应立即消毒并报告有关单位处理。材料接交按清单点清种类、数量,并准确记录签字。
?(二)动物材料的采集
动物体蚤的采集:收集的体蚤及其他昆虫,拣入装有0.5×10-5龙胆紫、2%盐水的小瓶内,注明寄主、采集地点、采集日期。巢穴蚤的采集:主要靠挖掘穴内的窝巢及表层泥土而获得。必须一地面游离蚤的采集:常用粘蚤纸收集,将粘蚤纸按要求放在房屋地
q鼠疫细菌检验必须在专用实验室内进行。q检验人员必须事前熟悉实验室管理制度,自身防护制度,q凡进入毒菌室操作,必须两人以上同时工作。q及时准确做好检验的各项实验记录。
§病人、尸体材料,特别是腐败材料必须在进行细菌培养的同时接种小白鼠(18~20g)或豚鼠(250~300g)§脏器块,置于消毒乳钵内,用灭菌剪刀剪碎并研成匀浆,加入适量生理盐水,制成悬液备用。§新鲜材料可用腹腔或皮下接种,豚鼠接种0.5~1.0mL,小白鼠接种0.2~0.4Ml。§腐败材料可采用经皮接种,剃去动物腹毛,并造成轻微划痕,将材料以棉拭子涂布于剃毛之皮肤上并擦之,涂擦时应以平皿盖掩盖,以防材料四溅。§接种实验动物后,做好标记,放入饲养笼内,挂牌记载编号、接种日期、途径等。每日饲养1~2次,直到动物死亡或经7d后杀死剖检。§如7d动物没有死亡,应处死动物,取动物的脾脏及有可疑病变组织制成匀浆,接种第2组动物,动物死亡或观察7d后处死,同时采集血清,做被动血凝试验。无阳性发现方可做出阴性报告。
§是由A组链球菌引起的急性呼吸道传染病,常侵犯5~15岁儿童,是儿童常见传染病之一,少数病人在病后可出现变态反应性心、肾并发症,在一定程度上,影响儿童的身体健康。是我国乙类的法定传染病之一。§标本采集:采取咽拭子、伤口炎性分泌物等标本§分离培养:可直接草线接种血琼脂平板进行分离培养。观察菌落形态及溶血现象,形成灰白色、透明或不透明、表现光滑、有乳光、直接0.5~0.75mm,圆形突起的小菌落,菌落周围形成2~4mm宽、界限分明、完全透明的溶血环。进一步涂片行革兰染色,证实为呈链状排列的革兰阳性球菌,菌呈圆形或卵圆形,直接0.5~1.0μm,链状排列,长短不一。分纯后进一步鉴定。
?病人血液的直接镜检?取早期病人血一滴,加蒸馏水一滴,使血细胞溶解,在暗视野显微镜下检查有否活动的钩端螺旋体。?取早期病人静脉血1~2mL于无菌试管中待凝固。离心沉淀,吸取血清与血细胞交界处略显白色的悬液。涂片后暗视野显微镜检查有否活动的钩端螺旋体。?差速离心暗视野检查法:采集早期病人静脉血1mL,加于含2mL枸橼酸钠盐水管中,1000r/min离心10min,吸上层血浆置另一清洁管中,3000~3500r/min离
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