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探究免疫功能检验方法的研究现状
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摘要：生物机体在种系进化和个体发育过程中，逐步获得的防卫能力即为人体的免疫功能。人体免疫功能的高低，直接影响着机体对外源性抗原或内源性抗原发生免疫的调节能力。本文主要研究了免疫功能检验的方法，旨在寻找特性确定、高效、稳定、无毒的理想检验方法，希望能为临床检验免疫功能提供一定的参考。
关键词：免疫功能；检验方法；免疫反应
前言
免疫功能是指机体对疾病的抵抗力，机体的免疫功能是在淋巴细胞、单核细胞和其他有关细胞及其产物的相互作用下完成的。机体的免疫功能失衡常用亢进或者低下来表示，但是不管哪一种，都会对机体产生不同程度的影响。所以，加强对免疫功能检验方法的研究，可以为免疫药物的进一步研究和质量控制提供一定的参考。
1免疫器官的功能测定
首先，对小鼠进行称重；然后，取其胸腺、脾脏，称量脏器的湿重，计算脏器的指数（实验动物某脏器的重量与其体重之比值）；最后，根据胸腺指数和脾指数是否升高来判定受试物对机体免疫的调节能力。
2细胞免疫功能测量
2.1MTT法
MTT法又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒，并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。1994年，董德平等人探讨了MTT比色法的条件，发现甲瓒溶解剂易引起蛋白沉淀，得出二甲基亚砜是一种较为理想甲瓒溶解剂；2000年赵承彦等人分析了MTT法显色条件，MTT反应体系在pH值为6.7。由于MTT法操作简单，检测结果准确，且无需要特殊的仪器设备，所以，国内外细胞免疫功能测量多采用此方法。
2.2同位素标记法
同位素标记法又称为同位素示踪法，即同位素可用于追踪物质的运行和变化规律，然后借助同位素原子以研究有机反应历程的方法。同位素掺入法的检测原理是利用有丝分裂原聚羟基脂肪酸酯、ConA等刺激机体T淋巴细胞产生增殖反应，然后增加机体的DNA和RNA的合成。比如，将H3-TdR加入到培养液中，其就可以被转化中的细胞摄入，淋巴细胞增殖的程度，可以通过测定标记淋巴细胞的放射强度反映。这种检测方法所采用的原材料成本较高，设备的投入较多，且还容易产生污染环境的现象。徐淑云所做的MTT比色法与3H-TdR渗入法两法比较试验，研究结果显示，虽然MTT法具有操作简单、快速的特点，但是只能检测已经形成的细胞，而同位素标记法可以检测DNA合成的启动阶段，且检测结果具有准确性。
2.3迟发型变态反应(DTH)
迟发型变态反应也称为Ⅳ型变态反应，其发生与抗体和补体无关，主要由T细胞介导的免疫损伤所致，病理学特征表现为以单个核细胞浸润和细胞变性、坏死为特征的局部超敏反应性炎症。有研究学者提出了利用绵羊红细胞抗原致敏，攻击注射动物的尾中部皮下，然后通过测定动物尾中部皮肤肿胀的程度，来表示迟发型变态反应，具有较高的重复性和可靠性；如今，多数的实验多采用1%丙酮麻油致敏，然后测量5天后耳肿胀程度，来表示迟发型变态反应。迟发型变态反应是一种较为方便的实验方法，但是在实验过程中，需要注意，致敏范围和打孔位置必须一致，否则会影响实验的结果。
3体液免疫功能测定
3.1抗体生成细胞检测
1975年Simpson和Gozzo根据溶血空斑原理将其改良成淋巴介导红细胞的分光光度法，将免疫脾细胞（对照用正常脾细胞），绵羊红细胞和补体在液相介质中进行反应，观察红细胞被抗体生成细胞产生的IgM所裂解，而释放的血红蛋白量，并用分光光度计进行定量测定，然后推算出抗体生成细胞的数量；1976年Gronwicz等人，通过加入针对产生免疫球蛋白细胞供者的Ig的抗体，从而细胞产生的免疫球蛋白结合形成复合物，复合物上的Fc片段可与连接在绵羊红细胞上的SPA结合，同时还能激活补体，使绵羊红细胞溶解形成空斑。
3.2血清溶血素的测定
血清溶血素的测定分为半数溶血值法和血凝法两种测量方法。其中，血凝法可以用于在绵羊红细胞免疫动物后，动物机体产生抗绵羊红细胞抗体，然后再利用其凝集绵羊红细胞的程度，来检测溶血素的水平。1979年徐学瑛对小鼠血清溶血素测定法进行了研究；1999年雷林生等人，对血清溶血素的测定方法进行了研究，研究结果显示，该法准确可靠、重复性好。半数溶血值法在绵羊红细胞免疫动物后，血清中出现SRBC抗体，会发生溶血反应，进而释放血红蛋白，最后可以通过测定动物血红蛋白含量，来推算血清中溶血素的含量。
4巨噬细胞功能测定
4.1小鼠腹腔巨噬细胞吞噬细胞实验
徐淑云研究了用新鲜鸡红细胞作为吞噬物，然后利用半体内法测定小鼠吞噬功能；1989年陈逐对徐淑云的方法进行了改进，将鸡红细胞进行醛化，并省去体内孵育步骤，进而提高了吞噬率和实验的稳定性；之后，有研
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