一活鲈鱼中同时检出单核细胞增生李斯特氏菌和副溶血性弧菌.docx

??

?

??

一活鲈鱼中同时检出单核细胞增生李斯特氏菌和副溶血性弧菌

?

??

?

?

?

?

?

?

?

???

?

?

?

?

?

摘要：目的按2016年江苏省食品微生物及其致病因子监测方案要求，我实验室对水产品检测副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌。方法按食品安全国家标准进行增菌、分离、生化鉴定及BD全自动微生物鉴定药敏系统。结果在一活鲈鱼中同时检出副溶血性弧菌和李斯特氏菌。结论外环境存在致病菌的风险较大，不管是酒店食堂还是家庭都要做到生熟砧板、食具分开，避免交叉污染，避免致病菌感染而患病。

单核细胞增生李斯特氏菌（Listeriamonocytogenes,LM）是李斯特氏菌属中唯一对人类致病的病原菌[1]。该菌是革兰氏阳性菌，是一种人畜共患病的病原菌[2]，能引起人、畜共患的李斯特菌病，主要表现为败血症、脑膜炎和流产等。该菌在自然界广泛存在，生存环境要求不高，是污染食物的重要病原菌之一[3]，WHO将LM列为20世纪90年代食品中4大病原菌之一[4]。副溶血性弧菌（Vibrioparahaemolyticus,VP）是革兰氏阴性嗜盐菌，广泛存在于世界各地温暖的河口环境中，是一种重要的食源性致病菌。副溶菌导致急性胃肠炎，有时甚至引起原发性败血症，疾病的发生与食用生、半生或交叉污染的水产品有关。近年来，我实验室承担了江苏省食品微生物及其致病因子监测的部分任务，在2016年水产品检测中从一活鲈鱼中同时检出副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌，现将实验过程报告如下：

1材料与方法

1.1材料

根据2016年江苏省食品微生物及其致病因子监测方案及我实验室承担的任务，我实验室于10月12日在水产市场采集鲜活的淡水鱼4件（鲫鱼2件，鳊鱼、鲈鱼各1件），冷冻的海鱼4件（小黄鱼2件，带鱼、青川鱼各1件）。

仪器与试剂：BD全自动微生物鉴定药敏系统，革兰氏阴性菌鉴定板，革兰氏阳性菌鉴定板，美国BD公司；弧菌显色培养基，李斯特氏菌显色培养基购于郑州博赛生物技术股份有限公司；LB1、LB2、PALCAM琼脂、血平板、SIM、3%氯化钠碱性蛋白胨水、TCBS、氧化酶试剂、革兰氏染色液，以上培养基及试剂均购于广东环凯微生物科技有限公司，并均在有效期内使用。

标准菌株：单增李斯特氏菌（ATCC7644），伊氏李斯特氏菌（ATCC19119），英诺克李斯特氏菌（ATCC33090），金黄色葡萄球菌（ATCC6538），马红球菌（ATCC6939）购自广东省微生物菌种保藏中心。

1.2方法

检测依据：按照《食品微生物学检验副溶血性弧菌检验(GB4789.7-2013)》《食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验（GB4789.30-2010）》增菌、分离、鉴定。

BD全自动微生物鉴定药敏系统：按照试剂盒的使用说明要求进行实验操作。

2结果

李斯特菌显色平板上为蓝色带有晕圈的菌落，PALCAM平板上为黑色凹陷有棕黑色水解圈的灰绿色菌落，革兰氏阳性短杆菌，SIM半固体上形成伞形，血平板上有溶血环，BD鉴定结果为单核细胞增生李斯特氏菌（见图1）。弧菌显色平板上为紫红色菌落，TCBS平板上为绿色菌落，氧化酶阳性，革兰氏阴性多形态菌，嗜盐性试验0%-，3%+，6%+，8%+，10%-，BD鉴定结果为副溶血性弧菌（见图2）。

图1：单核细胞增生李斯特氏菌细菌鉴定仪鉴定结果

图2：副溶血性弧菌细菌鉴定仪鉴定结果

3讨论

我实验室从4件活淡水鱼中检出3株副溶血性弧菌和1株单增李斯特氏菌；4件海鱼中检出1株单增李斯特氏菌；其中活鲈鱼（淡水鱼）中同时检出副溶和单增。据报道，在不同类型的水产品中，鱼类的感染情况是最严重的，副溶感染率达44.90%[5]。含有副溶的食品在未经加热或加热不彻底，或加工所用的器具、食品加工储存场所等相关环节均有发生交叉污染环境的可能，甚至引起副溶血性弧菌感染而患病。而副溶血性弧菌食物中毒在我国的微生物性食物中毒报告中一直居前列[6]。单核细胞增生李斯特氏菌在水产品中检出率较高可能是这类食品在低温条件运输、存放和销售极易造成污染，这与单增在4℃环境下仍能生长繁殖有关[7]。国家对单核细胞增生李斯特氏菌污染食品造成的危害相当重视，并列入了国家食品安全战略任务之一，已经将其列入国家年度食品安全风险监测检验日常项目之一[8]。

水产市场上一活鲈鱼中同时检出副溶和单增，而本次采样时间已是10月下旬，提示着外环境存在致病菌的风险是很大的。鲜美的鲈鱼是千万家庭喜欢自己烹饪的桌上佳肴，通过这次检测，提醒广大人民群众要加强家庭清洁卫生，生熟砧板、食具要分开，避免交叉污染，避免致病菌感染而患病。一般食物中毒的报导多见于集体聚餐以食堂酒店为主，而对于家庭发生的食物中毒未曾见报导，但也不是不存在，所以建议加强外环境致病菌