2025年高考生物一轮复习第十单元生物技术与工程第6课时基因工程的基本工具和基本操作程序课件苏教版.pptxVIP

;;;;拓展;2.重组DNA技术的基本工具

(1)限制性内切核酸酶(也称“限制酶”);(2)DNA连接酶;(3)载体;图解限制酶的选择原则;图解限制酶的选择原则;考向基因工程的基本工具

1.下表为常用的限制性内切核酸酶(限制酶)及其识别序列和切割位点，由此推断，下列说法错误的是;限制酶名称;;;2.(多选)第三代疫苗——DNA疫苗是指将编码保护性抗原蛋白的基因(如图甲)插入到适宜的质粒(如图乙)中得到的重组DNA分子，将其导入人体内，在人体细胞内表达的产物可直接诱导机体免疫应答，且可持续一段时间。限制性内切核酸酶的切点分别是BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ。下列分析错误的是;A.构建DNA疫苗时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒

B.图乙中只用EcoRⅠ切割后的质粒，含有1个游离的磷酸基团

C.用EcoRⅠ切割目的基因和质粒，再用DNA连接酶连接，只产生1种连接

产物

D.抗原基因在体内表达时不需要解旋酶;;3.下列有关基因工程中载体的说法，正确的是

A.在进行基因工程操作中，被用作载体的质粒都是天然质粒

B.所有的质粒都可以作为基因工程中的载体

C.质粒是一种独立于细菌染色体外的链状DNA分子

D.作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记

基因;;;;2.基因表达载体的构建

(1)目的：使目的基因进入_____________________________________

。;(2)基因表达载体的组成及作用;(3)构建过程;易错提醒;3.将目的基因导入受体细胞;辨析;辨析;4.目的基因及其表达产物的检测鉴定;考向基因工程的基本操作程序

4.戊型肝炎病毒是一种RNA病毒，ORF2基因编码的结构蛋白(pORF2)位于病毒表面，构成病毒的衣売。我国科研人员利用基因工程技术，在大肠杆菌中表达pORF2，制备戊型肝炎疫苗，过程如图。下列关于该疫苗的叙述，正确的是;A.过程①需要的酶是RNA聚合酶，原料是A、U、G、C

B.重组基因表达载体上的启动子需来源于戊型肝炎病毒

C.过程⑤需要用聚乙二醇处理大肠杆菌使其处于一种能吸收周围环境中

DNA分子的生理状态

D.过程⑥大量制备pORF2蛋白前应做相应的检测与鉴定;;;5.下列有关基因表达载体的叙述，不正确的是

A.具有复制原点，使目的基因能在受体细胞内扩增

B.???有启动子，作为多肽链合成的起始信号

C.具有标记基因，有利于目的基因的初步检测

D.具有目的基因，以获得特定的基因表达产物;6.(2021·全国乙，38)用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中要使用多种工具酶，其中4种限制性内切核酸酶的切割位点如图所示。;;(2)DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是____________。;(3)DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征，如质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中能___________；质粒DNA分子上有_______________________，便于外源DNA的插入；质粒DNA分子上有标记基因(如某种抗生素抗性基因)，利用抗生素可筛选出含质粒载体的宿主细胞，方法是_______________________________________________

___________________________。;;(4)表达载体含有启动子，启动子是指_____________________________

______________________________________________。;;;思考分析;思考分析;思考分析;(2)PCR技术和DNA复制的比较;(3)DNA的电泳鉴定;2.DNA的粗提取和鉴定

(1)基本原理

①原理：利用DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。

②DNA的性质：DNA不溶于，但某些蛋白质溶于；DNA能溶于2mol·L－1的。

③DNA的鉴定：在一定温度下，DNA遇试剂会呈现蓝色。;(2)过程;考向一PCR技术及电泳鉴定

7.(多选)(2023·江苏南京高三模拟)大引物PCR定点突变常用来研究蛋白质结构改变导致的功能变化。单核苷酸的定点诱变仅需进行两轮PCR反应即可获得，第一轮加诱变引物和侧翼引物，第一轮产物作第二轮PCR扩增的大引物，过程如图所示。下列有关叙述错误的是;A.PCR扩增的定点诱变产物通常需要连接到载体

分子上才能表达出相应的性状，需具备启动子、