园林苗圃第五章.pptVIP

第五章

园林苗圃育苗新技术;第一节 组织培养技术;园林植物新品种的引进和野生资源的开发利用,丰富了品种资源,同时也为城镇园林绿化建设提供了新的原材料。但由于新品种的种源偏少,扩繁技术跟不上等原因,使一些新优园林植物品种的迅速应用受到了限制。因此,现在不少园林苗圃运用了植物组织培养技术及工厂化育苗等先进的扩繁手段,迅速增加园林苗木新品种母株的数量,扩大园林植物新品种的群体,并与常规的苗圃生产方法相结合,不断地推出园林植物新品种,做到及时满足城镇园林绿化市场的需求。;园林植物的组织培养一般是指应用无菌培养的方法，在适当条件下，培养植物的一个离体部分(组织或细胞)而使其生长发育形成植株的技术。它有以下优点:

无性繁殖组织培养是通过体细胞分化增殖的，可以保持原有品种的优良性状，形成整齐一致的无性系。对一些生产上难以进行常规无性繁殖的植物或者至今完全不能进行无性繁殖的植物，在组织培养的特殊条件下能进行无性繁殖。

扩繁速度快组织培养是在人工控制的环境条件下进行的，植物生长发育，组织器官的分化与脱分化所需要的营养物质及生长激素都能得到满足。因此，比传统的无性繁殖要快得多。只要从优良母株上取下一小块组织，在合适的条件下，经过离体培养，在一年内就可以繁殖出成千上万的新植株，可以扩大和加速良种选育和鉴定的速度。

节省土地组织培养的材料是放在透明的容器中培养的，因此可以充分利用空间。通常30m2培养室可以摆放1万多个培养容器，同时繁殖几万株苗，而且周期短，周转快，可以周年生产。

脱毒通过脱除病毒与快繁技术相结合，可以加速发展脱毒植株，减轻园林苗圃病害的危害程度。;一、组织培养的基本条件;3．培养室 是培养材料生长发育的场所。要充分考虑温度、湿度、光照和空气等因素对培养体生长的影响，并且要求在无菌条件下进行培养。培养室温度一般控制在20—27℃，温度变化大而无规律易遭杂菌污染，相对湿度在70％一80％，光源可使用荧光灯或普通日光灯，光强为1000--30001x，光照时间大多是连续照光或16h照明。

4.培养基配制 组织培养和整体植物在营养上的主要区别是它的异养性，整体植物只需要无机营养，而组织培养则需另外供给C源和许多有机养料。各种植物以及同一植物的不同器官和材料进行培养时对无机养料的要求也略有区别，甚至在增减过程中也发生变化。因此在培养过程中随着组织和细胞的分化发育的进展正确选用培养基，及时调整培养基中的某项成分(转换培养基)是成功的关键之一。;二、培养基的配制;2.外檀体的消毒与接种将接种材料用自来水冲洗干净，擦干。然后，在超净台上或接种箱内，将接种材料浸在饱和漂白粉上清液里，作表面灭菌15—30min，也可用0.1％的升汞溶液加适量吐温，作表面灭菌8—12min。灭菌时间快到时，即倾去灭菌溶液，用无菌水涮洗多次，然后用无菌纱布吸干接种材料外部的水分，最后在无菌的条件下接种在培养基上以待器官分化。;3.芽的分化接种后，要使材料分化出许多芽，必须对培养基及激素的种类和浓度进行严格地筛选。在诱导芽的分化过程中，常用的基本培养基为MS培养基，适当降低MS培养基中无机盐的浓度，特别是降低氮素水平，对芽的分化和生长都是有利的。

激素的种类和浓度对芽的分化起着重要的作用。由于不同的植物和不同的组织器官所含的内源激素的种类和浓度不同，因而使细胞、组织、器官脱分化和分化所需要的激素水平也不相同。原则上讲，细胞分裂素可以促进芽的分化，常用的细胞分裂素有激动素、6-苄基腺嘌呤、玉米素和异戊烯基腺嘌呤。在快速繁殖中，一般用6—苄基腺嘌呤比激动素的效果好，合适的浓度一般为0.25mg／L。少数种类的植物适合用玉米素和异戊烯基腺嘌呤。生长素虽然不能促进芽的分化，但是一般植物芽的分化需要它与细胞分裂素浓度有一定的比例。当细胞分裂素的相对含量大于生长素时，有利于芽的分化和生长，在MS培养基中，附加0.5mg／L吲哚乙酸，lmg／L6—苄基腺嘌呤，是芽分化的最佳配比。

另外，也可将接种材料置在含高浓度生长素的培养基上，先诱导材料脱分化形成愈伤组织，然后诱导愈伤组织再分化形成不定芽或胚状体，继续培养后萌发成为小植株。也可以将愈伤组织打散，再进行液体转化培养，促进胚状体、芽和原球茎的分化，这样可使愈伤组织细胞同时分化出大量的原球茎和胚状体，大大加速无性系繁殖的速度。但是用这种方法所繁殖的植物，染色体倍性容易发生变化，影响无性系后代的一致性。;4．根的诱导 要促使试管苗生根，常用的有两种方法：一种是把试管苗在无菌条件下从叶腋处剪下来，转移到生根培养基上。生根培养基和分化培养基的差别主要在于生长素和细胞分裂素的比例上，适当增加生长素的浓度，不用细胞分裂素或极少量的细胞分裂素，一般在茎的基部就能分化