优质课动物细胞培养和核移植技术课件.pptVIP

复习：植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物组织培养技术、植物体细胞杂交技术动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。

阅读资料儿子捡鞭炮严重烧伤感染，父割千块皮肤2003年４月７日下午，12岁的四川简阳少年小林放学路上捡了些鞭炮，并把里面的火药抖出来，蹲在地上将其点燃，导致面部、四肢不幸被严重烧伤并感染，在当地医院治疗半月后，于4月22日转入武警四川消防总队医院烧伤整形科。为了挽救儿子的生命，小林的爸爸、妈妈向医生恳求：“割我们的皮给儿子吧！”烧伤整形科主任魏平经不起这份亲情的重托，最终“妥协”了：同意进行这种国内极其罕见的亲体皮肤移植手术。

思考一下！1、小林在皮肤烧伤之后，很容易得病，为什么？2、皮肤在我们人体当中是第几道防线，其他几道防线是什么？3、选取植皮时，理论上选择谁的皮肤最好？为什么？4、自身的健康皮肤是有限的，能不能通过其他途径获得自身的皮肤？

一、动物细胞培养过程阅读“动物细胞培养过程”并思考：1、动物细胞培养的概念是什么？该技术实施的原理是什么？2、为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞分散？3、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶可以吗？4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？6、简述动物细胞培养的操作过程

一、动物细胞培养1、概念：从动物机体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。原理：细胞增殖如何进行动物细胞培养?

2动物细胞培养过程动物胚胎细胞或幼龄动物的器官组织、动物组织原代胰蛋白酶传代培养胶原蛋白酶培养胰蛋白酶或胶原蛋白酶分散成单个细胞细胞悬液制成培养剪碎原理：细胞增殖（有丝分裂）结果：细胞群，细胞产物.培养条件

动物细胞生长特点：细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。

动物细胞生长特性接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。接触抑制

?原代培养：通常将直接从动物体内取出的动物组织消化后的初次培养称为原代培养。?传代培养：原代培养的细胞出现接触抑制后，贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞增殖。这样即为传代培养。

培养条件?1、无菌、无毒–消毒、灭菌–抗生素–定期更换培养液（清除代谢废物）?2、营养–合成培养基：糖、氨基酸、生长因子、无机盐、微量元素（血清、血浆）?3、温度和pH–36.5±0.5℃，?4、气体–95%空气，5%CO2

动物细胞培养技术的实际应用1、大量生产细胞或产物。如：病毒疫苗干扰素单克隆抗体胰岛素2、给基因工程提供受体细胞。3、检测有毒物质及毒性。4、用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据。.

二、动物体细胞核移植技术和克隆动物1.什么是克隆？克隆就是无性繁殖，具体地说，是指一个共同的祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。a.分子水平上：b.细胞水平上：一般指DNA克隆。指一个单一的细胞分裂所形成的细胞群体。c.个体水平上：指基因型完全相同的两个或一个群体。

2、克隆动物能否用类似植物组织培养的方法获得？为什么？目前不能。因为动物细胞的全能性随着分化程度的提高逐渐受到限制。目前，用动物体细胞克隆的动物，实际上是通过核移植来实现的。

核移植技术细胞核?将动物的一个细胞的＿＿＿，移入一个已经去掉细＿胞＿核＿的＿卵母＿细胞中，使其＿重组＿发育成一个新的＿胚＿胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。?分类?胚胎细胞核移植、体细胞核移植

体细胞核移植过程（体细胞克隆动物）MⅡ期卵母细胞去核去核卵母细胞代孕母牛克隆牛供体牛

总结：体细胞核移植过程细胞培养体细胞体细胞重组细胞（供核）注入卵巢卵母细胞（MⅡ中期：）（供质）去核的卵母细胞去核胚胎移植将胚胎移入受体（代孕）母生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛构建重组胚胎体据上图思考下列问题：

体细胞核移植技术?整个过程用了哪些技术？–细胞培养、核移植、胚胎移植?新生牛的性别、基因？–与供体相同?繁殖方式？–无性繁殖?原理？–动物细胞核的全能性

1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？为使核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自有