酵母细胞的固定化 (2).ppt

2、配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液称取无水Cacl20.83g。放入200mL的烧杯中，加入150mL的蒸馏水，使其充分溶解，待用。第31页,共45页，星期六，2024年，5月3、配制海藻酸钠溶液第32页,共45页，星期六，2024年，5月操作：称取0.7g海藻酸钠，放入50mL小烧杯中.加人10mL水，用酒精灯加热，边加热边搅拌，将海藻酸钠调成糊状，直至完全溶化，用蒸馏水定容至10mL。注意，加热时要用小火，或者间断加热，反复几次，直到海藻酸钠溶化为止第33页,共45页，星期六，2024年，5月加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环，涉及到实验的成败，一定要按照教材的提示进行操作。海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。应当注意什么问题？第34页,共45页，星期六，2024年，5月4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已活化的醉母细胞，进行充分搅拌，使其混合均匀，再转移至注射器中。为什么海藻酸钠溶液要冷却？第35页,共45页，星期六，2024年，5月第36页,共45页，星期六，2024年，5月5、固定化酵母细胞以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的Cacl2溶液中，观察液滴在Cacl2溶液中形成凝胶珠的情形。将这些凝胶珠在Cacl2溶液中浸泡30min左右。刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形成稳定的结构。第37页,共45页，星期六，2024年，5月第38页,共45页，星期六，2024年，5月一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的。检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用下列方法：第39页,共45页，星期六，2024年，5月这一阶段成功与否呢？怎样评价？观察凝胶珠的颜色和形状:如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。第40页,共45页，星期六，2024年，5月（二）用固定化细胞发酵1、将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2-3次。2、将150mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200mL的锥形瓶中，再加入固定好的酵母细胞，置于25℃下发酵24h。第41页,共45页，星期六，2024年，5月第42页,共45页，星期六，2024年，5月这一阶段成功与否呢？怎样评价？观察发酵的葡萄糖溶液；利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多气泡，同时会闻到酒味。还有其他方法吗？第43页,共45页，星期六，2024年，5月练习:1、制备固定化酵母细胞的过程中错误的是A、取干酵母，加入蒸馏水，使其活化B、配制海藻酸钠时，加热用大火，直到海藻酸钠溶化为止C、将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已活化的酵母细胞D、将凝胶珠在Cacl2溶液中浸泡30min左右B第44页,共45页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第45页,共45页，星期六，2024年，5月关于酵母细胞的固定化(2)知识回顾：1、洗衣粉中添加________，可以更有效地清除顽渍。常用的酶制剂有_________________四类。2、影响酶活性的因素有_______、________和_________。3、影响洗衣粉洗涤效果的因素有_______。第2页,共45页，星期六，2024年，5月在食品、化工、轻纺、医药等领域大规模使用酶制剂，说明酶制剂使用有很多优点，你能举出一些例子吗？酶制剂的使用有缺点吗？你能举出一些例子吗？酶制剂使用的优点催化效率高、低能耗、低污染等。第3页,共45页，星期六，2024年，5月1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活；2、溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；3、反应后会混在产物中，可能影响产品质量。酶制剂存在的缺陷第4页,共45页，星期六，2024年，5月如果你是工程技术人员，你如何解决这个问题？第5页,共45页，星期六，2024年，5月一、固定化酶1、固定化酶是指用物理或化学的方法将酶与固相载体结合在一起的仍具有酶活性的酶复合物。第6页