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病理组织切片制作过程详解

-森贝伽生物实验代做中心

公司中心实验室建设有病理学，分子生物学，细胞生物学，免疫学，蛋白质组学，实验动物模型构建，生

物芯片，生物信息学等实验技术服务平台。此外，还提供技术咨询培训，课题合作设计与申报，论文翻译

润色等实验技术服务。

1．取材

取材的好坏，直接影响切片的质量。取材时，首先要有一把锋利的取材刀，在切

割组织时要避免取材刀来回拖拉，切取的组织块厚薄要均匀，一般厚度以0.2～

0.3cm为适，较容易发脆的组织如甲状腺、肝脏、血块、淋巴结、大块癌组织等可适

当厚一点，而脂肪组织、肺组织、纤维性肿瘤、平滑肌瘤等致密的或试剂不易渗入的

组织应取薄一些；淋巴结应修掉两侧球冠，并尽量剔除周围的脂肪组织。在取材中还

应十分注意组织内是否有缝线或骨组织，如碰到不可避免的钙化组织，一定要非常小

心。在切取纤维组织、肌肉组织、胃肠道时，应注意纤维及肌肉的走向，取材时尽可

能按与纤维平行走向切取为佳。

(1）材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅

速固定，以保证原有的形态学结构。

(2）组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.2cm，以使固定液

能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也

不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以

缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3～0.5cm，这样可以同一蜡块

制作出较多的教学切片。

（3）勿挤压组织块:切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织

时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。

（4）规范取材部位:要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性

质的不同，根据要求规范化取材。

（5）选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往

往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。

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（6）保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、毛发、粘液、食物、粪便等，可用

生理盐水或PBS冲洗干净后再放入固定液中。

（7）保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完

全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。

2．固定

固定是病理制片工作的第一步，也是在整个制片过程中无法补救的一步。所谓“固定”，

就是组织离体后，用各种办法使其细胞内的物质尽量接近其生活状态时的形态结构和位置的

过程。固定的目的是为了防止组织细胞自溶与腐败，防止了细胞内的酶对蛋白质的分解作用，

使细胞内的各种成分如蛋白质、脂肪、碳水化合物或酶类转变为不溶性物质，以保持原有的

结构与生活时相仿。另外，组织固定后，均呈一定的硬化状态，增加组织韧性，而且不易变

形，有利于以后的组织处理。所以组织一旦离体必需及时固定，固定液的量应为组织的20

倍以上。固定的关键主要与固定的及时性、固定液的选择、固定液的浓度、固定的温度和时

间有关。最常用的固定液为10%中