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表面活性剂--第1页
外表活性剂
在生物学或生物化学实验室利用的去污剂都是作用比拟温和的外表活性剂〔二外表活性成份〕,是用来破
坏细胞膜〔裂解细胞〕以释放细胞内的可溶性物质。它们能够破坏蛋白质-蛋白质、蛋白质-脂质、脂质-
脂质之间的连接,使蛋白质发生构造上的变性,避免蛋白质结晶,另外在免疫学实验中还可避免非特异性
吸附。去污剂依照其特性能够分为宜几类,因此科学研究中去污剂的选择很关键,取决于后续研究的具体
内容。
实际应用中有众多不同的去污剂能够选择。为了某些特殊的应用,新的去污剂被不断开发出来。在这篇综
述中,对一些最经常使用的去污剂的特点和应用进展了论述。
去污剂是由一个疏水尾端基团和一个极性亲水头端基团组成的有机化合物〔图一〕。在必然的温度条件
A
下,以特定浓度溶解于水时,去污剂分子会形成胶束,疏水基团局部位于胶束内部,而极性亲水基团那么
在其外部〔图一〕。因此,胶束的疏水中心会结合到蛋白的疏水区域。一个胶束中,去污剂分子的聚集
B
数量,是用来评判膜蛋白溶解度的一个重要参数。去污剂分子疏水区域的长度和其疏水性成正比,且去污
剂的疏水区域超级恒定,而极性头端亲水基团是可变的,可据其特点,把去污剂分为三类:离子型〔阴离
子或阳离子型〕,两性离子型和非离子型〔见表一〕。在特定的温度下,外表活性剂分子缔合形成胶束的
最低浓度,称之为临界胶束浓度〔〕。当去污剂低于临界胶束浓度时,只有单体存在;当高于临界胶
CMC
束浓度时,胶束、单体和其余不溶于水的非胶束相共存。一样,胶束形成的最低温度称为临界胶束温度
〔〕。因此,温度和浓度是去污剂两相别离和溶解性的重要参数。一样来讲,低亲脂或憎油的去污剂
CMT
的临界胶束浓度会较高。
表一:去污剂的分类。
种类化合物
离子去污剂十一烷基硫酸钠〔SDS〕,脱氧胆酸钠,胆酸钠,肌氨酸
非离子去污剂tritonX100,十一烷基麦芽糖苷,洋地黄皂甘,tween20,tween80
两性离子去污
CHAPS
剂
离液剂尿素
表面活性剂--第1页
表面活性剂--第2页
图1.去污剂单体的一样构造
Hydrophilic_庄』
Hydrophobictail
Tailofzwitterionic
detergenU
Protein-detergentcomplex
headgroup
『霧卜!—
离子去污剂
离子去污剂是由一个亲水链和一个阳离子或阴离子的极性头端基团组成。此类去污剂的临界胶束浓度
一样高于非离子去污剂。此类去污剂活性较强。
十二烷基硫酸钠〔SDS〕阴离子去污剂:SDS是一种超级高效的外表活性剂,几乎能够使所有的蛋白
质溶解。它能够破坏蛋白质的非共价键,从而使蛋白质变性,并丧失天然构象和功能。SDS以质量比:
1与蛋白质结合〔或一个SDS阴离子结合二个氨基酸分子〕,因此即便蛋白质样品处于等电点,SDS
也能掩饰蛋白质此带电情形,使其带负电。这是被普遍利用的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理所在。
通常,为了在SDS存在时完全裂解细胞,样品必需通过超声处置或假设干次通过19G的针头,从而确
保DNA的完全降解。SDS会使蛋白质变性并破坏其三维构造,因此当研究中需要蛋白质的活性或蛋白
质的彼此作用存在时,不能利用SDS。当利用离子去污剂时,另外还要注意一些事项,因为在不同离
子强度的缓冲液中,它们的特性会随之改变〔例如说,当氯化钠浓度从0增加到500mM时,去污剂的
临界胶束浓度会从8mM降至。另外,SDS在温度较低时会发生沉淀,这是因为它属
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