亲脂性物质分析半制备课件.pptVIP

中药与天然产物活性成分的分离纯化——技术与策略

生命科学与生物药物的发展基因组DNARNA蛋白质组蛋白质（酶）基因工程药物色谱中药活性成分次生代谢产物次生代谢产物组天然产物活性成分

中药与天然产物研究存在的问题?化学成分复杂?有效成分种类很多：生物碱、甙、黄酮、醌、多酚、内脂、香豆素、萜、有机酸、寡糖、多糖、环肽、甚至蛋白质?数种有效成分并存，并一起作用?合成前体相同，配基链长不等?手性特征差异?含量很低

中药与天然产物分离纯化技术?提取分离操作?溶剂分配?超临界萃取?气相色谱?液相柱色谱?高速逆流色谱分析或半制备，亲脂性物质分析，低沸点物质分析、制备、生产，亲水性、亲脂性物质分析、半制备，亲脂性物质

色谱技术的应用存在的问题?天然产物色谱纯化理论滞后?研究方法替代生产工艺的模式?工艺技术单一正相层析（硅胶和大孔树脂）反相层析（C柱）、配合结晶技术需要全面发展色谱技术大孔吸附树脂分子排阻色谱反相色谱离子交换色谱亲和色谱高速逆流色谱

分离纯化策略涉及分离技术选择的因素提取的方法提取物或混合物样品的复杂程度样品的制备配合各种色谱技术是解决问题的最佳途径样品的极性样品的稳定性样品的溶解度样品量分离技术的互补性

分离纯化策略——亲水性化合物?大孔吸附树脂?离子交换色谱?亲水性分子排阻色谱?亲和色谱

分离纯化策略——亲水性化合物大孔吸附树脂?快速、高效、成本低?适宜于单味药某类成分某极性段的单向提取?不方便、不适于工艺放大：以聚苯乙烯为骨架，含有小分子致孔剂、交联剂等，在提取物中有较大残留。?吸附量下降至30％以上则不宜于再使用。?主要用于含生物碱、皂苷、蒽醌、水溶性酚性物质等中药单方或复方。

分离纯化策略——亲水性化合物离子交换色谱?典型的高选择性层析，分辨率高，载量大，工艺控制简单，规模容易放大?具有显著的浓缩效果，能够从含量低的大量样品中捕捉目标，适合于初步纯化阴离子交换?再生能力强多糖、肽类、皂甙等具有生物活性物质，需要温和分离纯化条件生物酸、生物碱等较强极性，对离子交换色谱选择性高的物质阳离子交换

分离纯化策略——亲水性化合物离子交换色谱R-NH,pKa=8.0pH8.0,R-NH3pH8.0,R-NH22++bindingtocationexchangernetpkacharge2pH10anionexchangerbindingtoR-COOH,pKa=5.0-pH5.0,R-COOH-pH5.0,R-COO

分离纯化策略——亲水性化合物离子交换树脂有机酸糖糖醇甙类甾类、萜类及多环化合物配糖体小肽氨基酸核苷酸

分离纯化策略——亲水性化合物离子交换色谱阳离子交换——UNOsphereSMacroPrepHighSMacroPrepCMUnoS可以直接从中药的稀酸浸提液中捕捉生物碱从黄连中分离盐酸小檗碱从苦参中分离苦参碱、槐定碱和氧化苦参碱从虫草中分离虫草素阴离子交换——可以直接从中药的稀碱浸提液中捕捉生物酸、UNOsphereQ皂甙、内酯、多酚、醇类等MacroPrepHighQMacroPrepDEAEUnoQ从葛根中分离葛根素从三七中分离三七素从柴胡中分离柴胡皂甙以及甘草酸、阿魏酸、咖啡酸、阿魏酸等的分离

分离纯化策略——亲水性化合物离子交换色谱阳离子交换适合生物碱的纯化粉防己碱防己林碱

分离纯化策略——亲水性化合物亲水性分子排阻色谱原理

分离纯化策略——亲水性化合物亲水性分子排阻色谱按分子量大小分离快速分离中小分子有机酸、碱、皂甙、内酯、多酚、醇类等去除高分子量成分和聚合物小分子较高分辨率分离1001001,00010,000100,0001,800Bio-GelP2Bio-GelP4Bio-GelP6Bio-GelP10Bio-GelP30Bio-GelP60Bio-GelP1008004,0006,0001,0001,50020,00040,00060,000100,0002,5003,0005,000

分离纯化策略——亲水性化合物亲和色谱——Affi-Gel硼胶ROHOHR对具有邻/顺式羟基的化合物具有高亲和力，可高效分离糖类，核苷酸，核苷，儿茶酚胺等化合物配基结构亲和机理A、分离环GMP和GMPB、分离各种核苷、碱基

分离纯化策略——亲脂性化合物?亲脂性分子排阻色谱?硅胶反相色谱?高速逆流色谱

分离纯化策略——亲脂性化合物高分辨率亲脂性分子排阻色谱原理

分离纯化策略——亲脂性化合物高分辨率亲脂性分子排阻色谱高分辨率，快速纯化酯类、芳香族，多环、杂环化合物Bio-BeadsS-X介质——多孔的聚苯乙烯二乙烯微球体Bio-BeadsS-X160014,000Bio-BeadsS-X3Bio-BeadsS-X82,0001,000介质可兼