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革兰阳性菌分类生物学特征及判定;内容;细菌分类工具书;革兰阳性球菌新分类;葡萄球菌科;乳杆菌科;气球菌科;肠球菌科;;链球菌科;BXIV门;革兰阳性球菌生物学特征;G+球菌;葡萄球菌属

微球菌属

口腔球菌属;触酶阳性常见菌属判别;葡萄球菌微球菌;葡萄球菌属;分类;主要判定试验;触酶试验（Catalase）：

原理：2H2O2?O2+2H2O;CatalasePOS;注意事项：

1、细菌、试剂新鲜

2、血琼脂上菌落不宜作此试验

3、阴、阳性对照;

凝固酶试验

（Coagulase）

;CoagulaseNEG;DNA酶

原理：DNA酶水解DNA长链，形成数个单核苷酸组成单核苷酸链。

长链DNA被酸沉淀、

单核苷酸溶于酸

而出现透明环。

;操作：

将待测菌点种于DNA琼脂平板上，

35℃培养24-48h，

在细菌生长物上加试剂（菌落浸没）

试剂：1mol/L盐酸

注意事项：

培养基表面凝固水烤干防止细菌蔓延状生长

;;金黄色葡萄球菌;表皮葡萄球菌;腐生葡萄球菌;;孔氏葡萄;镜下特点：G+C、葡萄状排列

;凝固酶阳性葡萄球菌判别试验;凝固酶阴性葡萄球菌判别试验;判定流程;微球菌属;分类;微球菌属生物学特征;藤黄微球菌;血琼脂：Micrococcusluteus;;革兰染色：Micrococcusluteus;粘液口腔球菌

;粘液口腔球菌生物学特征;;触酶阴性革兰阳性球菌;;Lancefield血清学分群：A、B、C、D、F、G等18个群

溶血：α、β、γ;生物学特征;链球菌属主要判定试验;杆菌肽（Bacitracin）试验

操作：K-B法贴杆菌肽纸片（直径6mm，0.04U/片），常规培养18-24h

结果判读：抑菌圈10mm敏感。;CAMP试验：

原理：细菌含有“CAMP”因子，能促进葡萄球菌β溶血素活性，使两种细菌在划线处展现箭头形透明溶血区。;操作：血平板上待测菌与金葡菌垂直划线，划线之间留出0.5-1cm,不能相接。

;Optochin敏感试验;注意事项

1、做敏感试验平板不能在CO2环境下培养，因其可使抑菌圈缩小。

2、同一血琼脂平板可同时测定几株菌株，但不要超出4株菌。

3、纸片可保留于冰箱中，普通可保留9个月。但假如已知敏感肺炎链球菌检测为耐药时，纸片应废弃。;PYR试验

原理

细菌产生吡咯烷酮酰肽酶（PEP）、水解L-吡咯烷??β-萘酚酰胺（PYR）基质，释放β-萘酚酰胺与试剂N，N-二甲氨基肉桂醛反应，产生桃红色为阳性。;操作：

将被检菌株接种上述试验平板上，35℃过夜培养后，加入一滴PYR试剂于菌落上，1min后观察结果。

结果判断

菌落出现桃红色为阳性，即水解PYR阳性，若菌落呈黄褐色是阴性。

;PYR商品化产品;血清分群诊疗：

A、B、C、D、F、G;A群链球菌

(化脓链球菌);主要判定关键点

β溶血

杆菌肽敏感

PYR试验阳性;阴性;临床标本培养后混杂在口腔正常菌群中化脓链;B群链球菌

（无乳链球菌）;;CAMP试验阳性;;;马链球菌

β溶血;D群链球菌

（非肠球菌，牛链球菌等）

;主要判定关键点

胆汁七叶苷阳性

6.5%氯化钠阴性;;C、F、G群链球菌判定：

常需要血清学方法;肺炎链球菌;生物学特征;77/169;肺炎链球菌;脐窝状菌落;粘液状菌落;肺炎链球菌;Optochin敏感;83/169;胆汁溶菌试验阳性;;;草绿色链球菌;菌群;鉴

定

流

程;;分类;生物学特征;生化反应

胆汁七叶苷试验（+）

6.5％NaCl生长试验（+）

PYR试验（+）

血清学分类属D群;;粪肠球菌;肠球菌属分群;肠球菌属Ⅰ群菌种关键性试验;肠球菌属Ⅱ群菌种关键性试验a;甲基葡萄糖吡喃糖苷(Methyl廿D-GlucopyranosideMGP)产酸试验

1、配制含有10g／LMGP和0．006％溴甲酚紫牛心浸液，分装试管每管2ml，121℃灭菌10min。

2、接种细菌(血平板上取数个菌落或过夜肉汤1滴)，孵育35℃1天，必要时可孵7天

3、肉汤由紫变黄色表示阳性。;RapidMGPMedium(5h);依罗霉素(Efrotomyc