中药显微鉴定.ppt

显微鉴别方法内容提要显微鉴定的简介显微制片方法的分类显微制片方法植物显微鉴定的简介(MicroscopicalIdentification)植物显微鉴定是植物鉴定的重要手段之一。它通过植物组织、细胞、细胞后含物等特征进行微观分析，达到鉴别真、伪、优、劣的目的。植物显微鉴别不但适用于中药材（饮片），也适用于中成药制品。这一检测方法先后被《中国药典》、《香港中药材标准》、《日本药局方》、《印度草药典》、《美国药典》等采用。《中国药典》附录Ⅱ显微鉴别法显微鉴别法系指用显微镜对药材（饮片）切片、粉末、解离组织或表面制片及含药材粉末的制剂中药材的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。鉴别时选择具有代表性的供试品，根据各种鉴别项的规定制片。制剂根据不同剂型适当处理后制片。显微鉴别方法分类1根据不同剂型适当处理后制片，分为：药材（饮片）显微制片：横切片或纵切片制片、粉末制片、表面制片、解离组织制片、花粉粒与孢子制片、磨片制片。含饮片粉末的制剂显微制片：按粉末制片法制片细胞壁性质鉴别：木质化细胞壁、木栓化或角质化细胞壁、纤维素细胞壁。细胞内含物性质鉴别：淀粉粒、菊糖、草酸钙结晶2根据切片方法，分为：徒手切片、冷冻切片、半薄切片（0.5-2.0微米）、超薄切片（50-70nm)。2仪器与材料2.1仪器生物光学显微镜（应配有目镜测微尺和载物台测微尺）、滑走切片机或徒手圆筒生物切片器、小型粉碎机、镜台测微尺、离心机、医用超声仪。2.2用具放大镜、刀片、解剖刀、镊子（包括粗镊及眼科弯镊与直镊）、剪（眼科剪与手术剪）、解剖针。载玻片、盖玻片、吸湿器（即玻璃干燥器改装蒸馏水加微量苯酚，潮气润湿药材样品用）、培养皿或小烧杯（放切片用，切片后的处理均可在其中进行）、酒精灯、铁三角架、石棉网、滴瓶、试管、试管架、滴管、玻璃棒（粗与细）、乳钵、量筒、毛笔（从刀上刷取切片用）、铅笔（HB、4H、6H绘图用）、带盖搪瓷盘（装切片标本用）、纱布、吸水纸（滤纸）、火柴等。粉末制片1药材粉碎选取完整的药材或待鉴定部位，粉碎，过《中国药典》4号筛备用。斯氏液装片斯氏液由醋酸∶甘油∶水（1∶1∶1）组成，主要用于观察淀粉粒及一些遇水合氯醛试液易溶解的成分。如多糖类成分、树脂类成分等。水合氯醛液装片水合氯醛试液能渗透组织，使皱缩的细胞膨胀；并能溶解淀粉粒、蛋白质、树脂、挥发油和叶绿素等，使细胞组织变得透明而清晰。2粉末特殊处理制片方法含多量淀粉的药材粉末大量淀粉粒的存在会影响观察、描绘及摄影等效果。取一部分粉末于试管中加水煮沸，使淀粉粒糊化而溶解，放置或用离心机使所需细胞、组织下沉管底，用长吸管将沉淀物吸出供制片观察。3粉末特殊处理制片方法含多量油类的药材粉末进行脱脂以除去大部分油脂，取少许粉末于小烧杯中，加氯仿少许搅拌浸渍，过滤，在滤纸上再加少许氯仿洗涤粉末即可。也可直接将粉末置载玻片进行。含纤维较多的粉末细胞彼此不分离，则可以用5%氢氧化钾溶液浸渍若干小时或在水浴上加热浸渍，使组织分解后再行制片观察。颜色很深的药材粉末进行脱色处理，取粉末少许置小烧杯中或载玻片上，加少许3%的过氧化氢溶液（双氧水）浸渍数分钟，待粉末颜色变浅时，除去多余液体，加新煮沸的冷蒸馏水，以除去粉末中的大量气泡即可，然后再行制片观察。水泛丸：全球面取样，将丸药从中心剖开，从1/2球面上刮取。大蜜丸：将丸药从中心剖开，从1/2或1/4球面上刮取；也可从内部挑取适量粉末。4中成药粉末制片散剂、颗粒剂、胶囊：挑取部分粉末；包衣丸、片：剥除糖衣或包衣，取适量丸或片心磨碎后，取粉末装片。5粉末制片注意事项装片用的液体如易挥发，应装片后立即观察。用水装片也较易蒸发而干涸，通常滴加少许甘油可延长保存时间。粉末加液体搅拌及加盖玻片时容易产生气泡。如用水或甘油装片时，可先加少量乙醇使其润湿，可避免或减少气泡的形成，或反复将盖玻片沿一侧轻抬，亦可使多数气泡逸出。搅拌时产生的气泡可随时用针将其移出。粉末药材制片时，每片取用量宜少不宜多，为使观察全面可多做些制片。如取量多，显微特征单一轮廓不清，反而费用时，不易得出准确强论。中成药制剂的粉末检查，因在多味药材粉末中寻找某一味药的某一显微特征，有时较难查见，可以取粉末量多些，置试管或小烧杯中，加入水合氯醛试液，加热透化。透化好后再用吸管吸出，滴在载玻片上，加盖玻片，即可观察。需用水合氯醛试液透化时，应注意掌握操作方法。装片后用手执其一端，保持水平置小火焰上约1～2cm处加热，并缓缓左右