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第七章微生物的生长与控制;7.1微生物的分离纯化方法;7.2微生物生长的测定;在细胞数量测定的时候,样品往往先经处
理,如打碎、稀释、浓缩等。
液体稀释培养计数法适用于测定一个在混
杂的微生物类群中不占优势,但却具有特
殊生理功能的类群,如能分解纤维素、硝
化、硫化、自生固氮等。它须通过该生理
功能的表现来判断该微生物的存在和大概
数量。; 纤维素分解菌的最大或然数法
稀释度 10-3 10-4 10-5 10-6 10-7 10-8
试验管数5 5 5 5 5 5
反应管数5 5 5 4 1 0
五次重复测数统计表
数量指标 近似值 数量指标 近似值
10010-110-2 10010-110-2
0 1 0 0.18 5 0 02.3
1 0 0 0.20 5 10 3.3
3 1 0 1.1 5 4 0 13
4 1 0 1.7 5 41 17 ;(B)生物量的测定;7.3微生物纯培养的群体生长规律;(1)适应期
又称延迟期,细菌的数目保持不变,甚至稍有减
少。分裂迟缓,代谢活跃。
适应期的长短与微生物的种类、菌龄、生长状态
与接种前后的环境条件有关。在生产实践中,为
了缩短适应期,常采用的措施有:选择生长繁殖
快的菌种,加大接种量,选择菌种活力旺盛时期
(对数期)接种,减小环境差。;(2)对数期
菌数对数增长,活力旺盛,个体形态和生理特性比
较稳定一致。细菌的代谢活性最强,繁殖一代需要
的世代时间最短,而且稳定。此期适宜接种和基本
代谢的研究。
细胞数目 20 21 22 23 24~2n
X2=X1.2n
lgX2=lgX1+nlg2
繁殖代数 n=3.3(lgX2-lgX1); t2-t1
世代时间G=
n
t2:细菌数目为X1时的培养时间
t1:细菌数目为X2时的培养时间
例:某菌正处于对数期,在60分钟时取样,测菌
数为100/ml,在159分钟时取样,测菌数为
10000/ml,求它的世代时间。
159–60
G=
3.3(lg10000-lg100)
=99÷3.3(4-2)
=15分钟;(3)稳定期
细菌活力下降,世代时间延长,部分细菌停
止分裂繁殖,新细菌的增加和老细菌的死亡数量
趋向平衡,活菌总数保持相对的稳定,培养液中
活菌数达到最大值。这是因为营养物质的消耗;
代谢产物的积累;环境温度、pH值、氧化还原电
位改变,不利于微生物的生长造成的。
稳定期的细菌开始形成储藏物质和积累代谢
产物,开始形成芽胞,它是积累代谢产物的重要阶段,适宜收获菌体。;(4)衰亡期;二次生长;葡萄糖耗尽;7.4连续培养;(1)恒浊连续培养
通过光电装置自动测定并调节加入培养
液的流速来保持培养物浊度恒定的培养方
法。它可以实现微生物的高速生长,并提供
大量形态与生理特征一致的细胞。在发酵工
业中,为了获得大量菌体及与菌体平行的代
谢产物时,往往采用此法。;(2)恒化连续培养;恒浊连续培养;7.5环境条件对微生物生长的影响;(1)温度;oC;致死温度;巴氏消毒法
引起环境中大多数污染菌死亡的温度都
在60oC以内,所以为了不影响食品的营养
和风味,多采用在较低的致死温度下,稍
长于致死时间的消毒方法,如63~66oC
30分钟或70oC15分钟。
高温灭菌法
湿热蒸气灭菌:121oC,30分钟。
干热灭菌:160~170oC,1~2小时。;对一种微生物来说:
超过它的最高生长温度可杀死它
采用它的最适生长温度可培养它
低于它的最低生长温度可保存它;(2)氢离子浓度;环境中微生物可生存的pH值范围在1~11之间,
具体到每种微生物而言:
细菌最适pH值在6.5~7.5之间。
放线菌最适pH值在7.5~8之间。
酵母菌、霉菌适合于pH5~6的酸性环境。
因为微生物在生长过程中的代谢产物可以改
变环境中的pH值,所以在培养微生物时,培养基
不但要调节pH值,还要选择适合pH值的缓冲。
如磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液等。 ;(3)通气条件对微生物生长的影响;(4)氧化还原电位(Eh)对微生物的影响;Eh对微生物的影响是:
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