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江苏省市场监督管理局发布I
ICS65.020.20
B31DB32—2022
江苏省地方标准
DB32/T××××—2022
铁皮石斛干细胞室内培育生产技术规程
TechnicalregulationoftheindoorcultivationofstemcellsfromDendrobiumoficinale
(送审稿)
2022-00-00发布2022-00-00实施
I
DB32/T××××—2022
目次
目次 I
前言 II
1范围 1
2规范性引用文件 1
3术语和定义 1
3.1铁皮石斛干细胞室内培育 1
4生产条件 1
5种源干细胞获取、筛选与增殖 1
5.1培养基配制 1
5.2种源干细胞获取 1
5.3种源干细胞筛选纯化 2
5.4种源干细胞增殖 2
6培育生产 2
6.1培养基配制 2
6.2培育操作 2
7规模化生产 2
8日常管理 2
9采收 2
10质量等级划分 3
11包装、运输、储存 3
11.1包装 3
11.2运输 3
11.3贮存 3
II
DB32/T××××—2022
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
本文件由江苏省农业科学院提出。
本文件由江苏省园艺标准化委员会归口。
本标准起草单位:江苏省农业科学院,苏州普朗特尔皮肤细胞科技有限公司,西交利物浦大学,苏州珀立科技服务有限公司,思格(苏州)生物科技有限公司,苏州工业园区服务外包职业学院。
本标准起草人:陈小龙、张杰、吴红升、余向阳、宋立晓、周燕群、王牧、任宝永、李毅、覃鸿妮。
1
DB32/T××××
铁皮石斛干细胞室内培育生产技术规程
1范围
本标准规定了铁皮石斛干细胞室内培育的术语和定义、生产条件、种源干细胞获取、筛选与增殖、培育生产、规模化生产、日常管理、采收、质量等级划分、包装、运输及贮存。
本标准适用于铁皮石斛干细胞室内培育生产。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期引用文件,仅所注日期版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有修改单)适用于本文件。
GB5749生活饮用水卫生标准
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1铁皮石斛干细胞室内培育(TheindoorcultivationofstemcellsofDendrobiumofficinale)
从铁皮石斛茎尖部分离体培养植物愈伤组织,经稳定培育,得到铁皮石斛植物干细胞,再通过进一步扩增培育成的稳定迅速增殖铁皮石斛干细胞培育技术。
4生产条件
室内环境为十万级以上洁净度的洁净间。保持室温25oC~28oC。均匀柔和人工光,光照强度为
2000Lux,种源培育与增殖阶段为完全黑暗,种源生产阶段光暗周期8h:16h。空气相对湿度40%~70%。生产用水和过滤水应分别符合GB5749和GB/T6682的规定。
5种源干细胞获取、筛选与增殖
5.1培养基配制
采用1/2MS培养基+2mg/LNAA+0.5mg/L6-BA+20g/L蔗糖+7.5g/L琼脂固体培养基进行种源干细胞诱导固体培养。采用1/2MS培养基+1mg/L6-BA+20g/L蔗糖+7.5g/L琼脂固体培养基进行种源干细胞增殖固体培养。
5.2种源干细胞获取
将成熟铁皮石斛茎尖组织从茎段上分离后,切成细小的组织块,加入固体培养基中培养,在完全
2
DB32/T××××—2022黑暗条件下培养2周~4周,获得愈伤组织细胞。在相同固体培养基和培养条件下增殖愈伤组织细胞。
5.3种源干细胞筛选纯化
愈伤组织细胞增殖后,每10d将死亡的、褐化和玻璃化的愈伤组织清理出培养体系,筛选留存淡黄色或浅绿色、生长茁壮、均一的种源干细胞进一步培育。
5.4种源干细
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