巴氏染色--课件.pptVIP

Start?巴氏染色巴氏染色巴氏染色是人体和动物脱落细胞学最常用的染色方法之一，广泛应用于呼吸系统、泌尿系统及女性生殖系统等脱落细胞学的诊断及微生物感染的鉴定等领域，特别在宫颈脱落细胞学诊断方面更具有独到之处。巴氏染色的优点1、颜色鲜艳多彩2、细胞结构清晰3、胞质颗粒分明4、透明度好等巴氏染色的不足1、配置过程复杂2、染色步骤繁琐3、染液质量不稳定等（影响染色的主要原因）巴氏染色的组成苏木素桔黄GEA50（EA36）等EA50简介EA50的组成：伊红，亮绿，磷钨酸影响EA50的主要因素：EA染液的PH值巴氏染液原理蛋白质所带正负电荷的多少是随染液的PH值而改变，在偏碱环境中蛋白质的羧基游离增多（带负电），在偏碱环境中氨基游离增多（带正电）。氨基酸结构通式氨基酸三维结构巴氏染液原理苏木素染色原理：苏木素是碱性染料，能与细胞核内的主要化学成分脱氧核糖核酸结合而呈紫蓝色。苏木素结构墨水树巴氏染液原理桔黄G：是一种小分子染料，能够很快地作用于胞浆。作用：使宫颈、阴道上皮中非正常角化细胞和角化型鳞癌细胞的胞浆呈鲜艳的橘黄色。桔黄G巴氏染液原理伊红、亮绿：属于酸性染料，其发色团为负离子，发色团可与蛋白质中带正电荷的氨基结合，而使胞浆显蓝色、绿色或红色。巴氏染液原理伊红染料作用于成熟鳞状细胞的胞浆、核仁，染色结果呈粉红色。亮绿染料作用于代谢活跃的细胞，如鳞状上皮副基底层和中层细胞、柱状上皮细胞，染色结果呈绿色或蓝绿色。伊红结构式巴氏染液原理磷钨酸：酸性质子的位置不同，酸性强度也不同，其中位于桥氧的酸性质子具有超强酸性，其酸性甚至超过浓硫酸。作用：1、作为媒染剂 2、作为弱酸缓冲剂磷钨酸结构式巴氏染液的影响因素---PH较高PH值：细胞质红染减少，绿染增多较低PH值：细胞质红染增多，绿染减少巴氏染液的存放染液保存在阴凉干燥的地方，避免阳光直射。阳光或过高的温度不仅造成染料过早失效，还会引起染液PH值降低。经典巴氏染色结果胞核染为深蓝色；鳞状上皮底层、中层及表层角化前细胞胞质染绿色，表层不全角化细胞胞质染粉红色，完全角化细胞胞质呈桔黄色；细菌：灰色；滴虫：淡蓝灰色；黏液：淡蓝色或粉红色；中性粒细胞和淋巴细胞、吞噬细胞胞质均为蓝色；红细胞染粉红色；高分化鳞癌细胞可染成粉红色或桔黄色；腺癌胞质呈灰蓝色。简易巴氏染色步骤将刚离心好的TCT玻片放入95%的酒精15min以上（此步骤为湿固定，TCT玻片不能用吹风机吹干）70%酒精15s50%酒精15s自来水水洗苏木素染色1%盐酸分化0.5%氨水蓝化自来水洗0.2%磷钨酸水溶液1Min简易EA工作液5min95%酒精清洗100%酒精清洗吹干，封片简易巴氏染色简易EA染色液的配置：亮绿S.F：0.72g水溶性伊红：1.08g蒸馏水：600ml三者混合摇匀，让两种燃料充分溶解0.2%磷钨酸：0.2g磷钨酸粉末100ml蒸馏水简易EA染色结果细胞核：呈蓝色基底层、中层、表层角化前细胞质：蓝绿色表层细胞质：红色挖空细胞辨认清晰念珠细菌：紫红色滴虫细胞质：浅绿色、细胞核深蓝色阴道杆菌：紫蓝色。Start?