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显微镜的概述*瑞利条件(根据光的衍射理论):两个相邻的点光源能够经光学折射系统被分辨开来的必要条件是每一个衍射斑的中央亮圆中心落在另一个衍射斑的第一暗环上。瑞利以此作为光学系统的分辨极限,称为瑞利条件。????平行光束单缝衍射双缝衍射光波的衍射(Diffraction)衍射:当一束平行光通过窄的开口如狭缝时发生弯曲的现象。显微镜的概述*AiryDiskFormationbyFiniteObjectiveApertureThewidthofcentralmaximumprop.to?andinverslyprop.toobjectiveaperature显微镜的概述**光学显微镜的分辨本领显微镜的概述*分辨率与分辨距离的关系:它与“分辨距离”成反比。分辨距离越小,显微镜的分辨率越高。如果两物点间的距离小于分辨距离,就会把两点看成一点,也就不能看清它的结构。显微镜的分辨率是由物镜来决定的。目镜只起“放大镜”的作用,并不提高显微镜的分辨率。显微镜的概述*物镜的分辨距离的数学表达式:在普通中心照明的情况下,物镜的分辨距离由下式决定:d=λ/2N.A.式中d表示分辨距离,入表示照明光线的波长。显微镜的概述*用可见光照明的普通显微镜,分
辨距离的极限是多少?在可见光中亮度最大而且对人眼最敏感的波长为0.55um;物镜最大的N.A.为1.4;代入公式:d=λ/2N.A.可得:d=0.55/(2X1.4)≈0.2um。即利用可见光的普通显微镜,在中心照明的情况下,分辨距离的极限为0.2um。显微镜的概述*提高物镜的分辨率的方法:分辨距离公式:d=λ/2N.A.1)、提高物镜的数值孔径N.A.。2)、使用波长较短的照明光线。显微镜的概述*利用紫外线作为光源的分辨距离与可见光的比较:紫外线的波长比可见光短,约为0.27um,可见光波长为0.55um;利用紫外线作为光源的紫外显微镜,分辨距离公式:d=λ/2N.A进行计算;其分辨率高于可见光一倍,分辨距离可达0.1um。但因为眼睛看不见紫外线,只有拍成照片以后再观察。比紫外线的波长更短的还有x射线,γ射线等,但目前没有发现可用的透镜材料。显微镜的概述*显微镜的概述*(三)放大率显微镜的放大率的概念:指物体经物镜、目镜两次成像后眼睛所能看到像的大小与原物体大小的比值。即是物镜的单向放大率m和目镜的角放大率α的乘积。显微镜的概述*显微镜的放大率数学表达式:M=m·α=L/f物×250/f目式中M表示显微镜的总放大率;L/f物表示物镜的放大率;250/f目表示目镜的放大率;L表示显微镜的光学筒长;f物表示物镜的焦距;f目表示目镜的焦距;250(毫米)表示明视距离。显微镜的概述*为什么显微镜的放大率不能无限的增大?1)M=m·α=L/f物×250/f目从公式可知,物镜和目镜的焦距愈短,光学筒长愈长,总放大率愈大。但焦距太短或镜筒过长,都会造成工作不方便。因此,显微镜的放大率不能无限的增大。2)显微镜的放大率是受分辨率制约的。如果标本的细节不能分开来,过度的放大,毫无意义。显微镜的概述显微镜的概述显微镜的概述*第二章光学显微镜目的:认识光学显微镜的性能参数和掌握光学显微镜的基本结构。要求:一、了解光学显微镜(opticalmicroscope)的发展简史;二、熟悉光学显微镜的基本原理和性能参数;三、掌握光学显微镜的基本结构。显微镜的概述*1、光学显微镜有哪些光学参数?如何正确应用这些参数?2、什么叫数值孔径、放大率和分辨率?他们由哪些因素决定以及他们之间有何关系?3、透镜有几种像差?怎样产生的?如何消除?4、物镜与目镜在工作条件和技术要求上有些什么不同?如何正确使用?5、物镜上标有“10/0.25”,“160/0.17”,请说明这些数字所表示的意义?显微镜的概述*6、可变光栏的作用是什么?7、显微镜的聚光镜与物镜的怎样进行搭配?8、显微镜照明系统的基本要求是什么?9、显微镜的照明方式分为几种?各有何特点?10、显微镜的光学系统有哪几部分组成?各起什么作用?显微镜的概述*
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