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分析生物素探针分子杂交检测血清乙肝病毒DNA的结果
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【摘要】目的研究生物素探针分子杂交检测血清乙肝病毒DNA的结果。方法针对60例不同人群乙肝病毒经RPHA、ELISA法检测乙肝血清五项指标后分为三组，分别为HBsAg,HBeAg,抗-HBC三项阳性组（n=24）；单项抗一HBC阳性组（n=25）乙肝五项指标皆阴性组（n=11），对三组病例检验后的阳性数、HBV-DNA的检出和HBsAg,HBeAg滴度之间的关系、HBV-DNA的检出和被检验者肝功能之间的关系进行对比。结果检测出HBV-DNA阳性14例，占总数的23.33%，HBV-DNA的检出和HBsAg,HBeAg滴度之间关系不大。在14例被检验者中，有5例为肝功能异常，异常率为35.71，对其进行统计学检验，结果没有明显差异（p＞0.05）。结论针对乙型肝炎病毒人群，体内病毒复制和感染性以及预后判断均需要慎重对待。
【关键词】实时荧光定量的检测；杂交检测；乙肝病毒DNA
血清HBV-DNA检测属于当下对乙型肝炎进行诊断，对HBV复制以及被检验者肝脏病变和预进行判断过程中最为重要的指标之一。本院引进实时荧光定量的检测方法，针对60例不同人群乙肝病毒核酸作出进一步检测，现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
针对60例不同人群乙肝病毒核酸作出进一步检测，分成三组，分别为HBsAg,HBeAg,抗-HBC三项阳性组（n=24）；单项抗一HBC阳性组（n=25）乙肝五项指标皆阴性组（n=11）。全部被检验者中，男性32例，女性38流，被检验者年龄在30-70岁之间，平均年龄为（54±3.5）岁。
1.2检验方法
在进行具体试验过程中，严格按照《临床基因扩增（PCR）诊断实验室工作规范》要求进行，所使用的试剂由上海长征复星生产。此后根据试剂盒操作方式将HBV-DNA（破裂解法）进行提取，然后把标准品和所提取的DNA放入到反应液当中去，此后再放置在荧光定量仪当中对其进行扩增，并进行检测。具体扩增时的条件是：94℃1min预变性，此后再按照95℃5s、60℃30s进行，一共开展42个循环。将灵敏度控制在2×102拷贝/ml[3]。
1.3诊断标准
试验结果显示出蓝色斑点则证明为阳性[4]。
1.4统计学分析
采用SPSS16.2软件行统计学分析，计数资料采用（%）表示，两组间比较采用χ2、t检验，选择()表示计量资料，P＜0.05为差异有统计学意义。
2结果
在60例被检验者的血清中共检测出HBV-DNA阳性14例，占总数的23.33%，这些被检验者当中HBsAg、HBeAg、抗-HBC三阳组阳性率最高，所占比重为45.83%，其次是乙肝五项指标皆阴性，占据18.18%，单项抗一HBC阳性者最低，占据4%。这三者之间具有显著差异，存在差异统计学意义（p＜0.05），具体情况如表1所示：
表1三组间乙肝HBV一DNA的检出结果
HBsAg,HBeAg,抗-HBC三项阳性
单项抗一HBC阳性者
乙肝五项指标皆阴性
合计
检测例数
24
25
11
60
阳性数
11
1
2
14
阳性率（%）
45.83
4
18.18
23.33
分析HBV-DNA的检出和HBsAg,HBeAg滴度之间的关系，具体情况如表2所示：
表2HBV-DNA的检出和HBsAg,HBeAg滴度之间的关系
HBV-DNA
HBsAg滴度
HBeAg滴度
≥1：128＜1:128
合计
≥:128＜1:128
合计
+
82
10
54
9
-
92
11
65
11
对表2中数据进行分析和比较，结果显示HBV-DNA的检出和HBsAg,HBeAg滴度之间关系不大。
此外，判断HBV-DNA的检出和被检验者肝功能之间的关系，结果显示，当HBV-DNA为阳性的时候，在14例被检验者中，有5例为肝功能异常，异常率为35.71，对其进行统计学检验，结果没有明显差异（p＞0.05）。
3讨论
血清HBV—DNA的检测是当前医学界，对HBV进行复制，对被检验者肝脏病变以及预后最为重要的指标之一，本院采用实时荧光定量的检测方法，对乙肝病毒DNA进行检验。对乙型肝炎标志物以及乙肝病毒DNA进行判断，尤其是后者，对乙型肝炎进行判断是最为直接的，并且也具有较高的可靠性[5]。
本研究结果显示：针对60例不同人群乙肝病毒DNA进行检验，HBV-DNA阳性14例，占总数的23.33%，HBsAg,HBeAg,抗-HBC三项阳性、单项抗一HBC阳性者、乙肝五项指标皆阴性被检验者阳性率存在显著差异（p＜0.05），具有差异统计学意义。此外，显示HBV-DNA的检出和HBsAg,HBeAg滴度之间关系不大，判断HB
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