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生物技术1001班李久香
作业2:氨基酸与蛋白质一级结构
1.解释下列名词:
①两性离子(dipolarion):带相反电荷的极性分子
②必需氨基酸(essentialaminoacid):只能在体内合成不能从外界摄取的氨基酸
③非蛋白质氨基酸(nonproteinaminoacid):不存在于蛋白质分子中而以游离状态和
结合状态存在于生物体的各种组织和细胞的氨基酸
④等电点(isoelectricpoint,pI):物质以两性离子形式存在,处于完全解离状态,无
静电荷变化,呈电中性,在电场中不移动时的pH
⑤肽平面(peptideplane)或肽基(peptidegroup):与肽键相连的亚氨基、羰基和两
端的a-C构成的一个近似的平面
⑥蛋白质一级结构(proteinprimarystructure):氨基酸的排列顺序
⑦盐析(saltingout):随着溶液中盐浓度的逐渐升高,蛋白质的溶解度逐渐降低,蛋白
质分子彼此聚集而沉淀下来的现象
⑧盐溶(saltingin):在盐浓度很稀的范围内,随着盐浓度的升高,球状蛋白质的溶解
度也升高的现象
⑨Edman降解(Edmandegradation):用苯异硫氰酸在温和的碱性条件下,与肽链N-末
端残基自由的α-氨基反应,生成苯氨基硫甲酰基衍生物,即PTC-多肽。除去过量的试剂,用
无水三氟乙酸处理,即可释放氨基末端残基的噻唑啉酮衍生物。噻唑啉酮-氨基酸可用有机溶
剂抽提,再用含水酸处理,转变成更稳定的乙内酰苯硫脲-氨基酸,鉴定该氨基酸衍生物,即
可知N-末端残基是何种氨基酸。由于用弱酸处理,条件温和,未打断肽链中的其他肽键。因
此,上述反映的第二个常务被分离之后,可重复上述反映。这个循环方法即称Edman降解法
⑩蛋白质的沉淀作用(precipitation):由于外界条件改变,蛋白质水化膜被除去且其电荷被中和时,
蛋白质凝聚成团下沉,但其结构未变.
2.填空
①蛋白质中的_酪氨酸_、_色氨酸_和__苯丙氨酸_3种氨基酸具有紫外吸收特性,因而使
蛋白质在280nm处有最大吸收值。
②当氨基酸溶液的pH=pI时,氨基酸以_两性_离子形式存在,当pHpI时,氨基酸以羧
基负离子形式存在。将精氨酸(pI值为10.76)溶于pH7的缓冲液,并置于电场中,则精氨酸
向电场的__负__方向移动。
③谷氨酸的pK1(α-COOH)=2.19,pK2(α-NH+3)=9.67,pKR(R基)=4.25,谷氨酸的
等电点为_3.22_。
④氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧脱氨反应生成_蓝紫色化合物,而_脯氨酸_与茚三酮反
应生成黄色化合物。
⑤蛋白质多肽链中的肽键是通过一个氨基酸的氨基和另一氨基酸的_羧_基连接而形成
的。
⑥大多数蛋白质中氮的含量较恒定,平均为_16__%,如测得1克样品含氮量为10mg,则
蛋白质含量为_6.25___%。
⑦用电泳方法分离蛋白质的原理,是在一定的pH条件下,不同蛋白质的__等电点______、
_分子大小__和__电荷___不同,因而在电场中移动的__方向__和_速度_不同,从而使蛋白质得
到分离。
⑧鉴定蛋白质多肽链氨基末端常用的方法有__2,4—二硝基氟苯__和_二甲基氨基萘磺酰
氯。
⑨今有甲、乙、丙三种蛋白质,它们的等电点分别为8.0、4.5和10.0,当在pH8.0缓冲
液中,它们在电场中电泳的情况为:甲_不移动_,乙_正向移动__,丙_负向移动_。
⑩将分子量分别为a(90000)、b(45000)、c(110000)的三种蛋白质混合溶液进
行凝胶过滤层析,它们被洗脱下来的先后顺序是_cab__。
3.氨基酸的侧链对多肽或蛋白质的结构和生物学功能非常重要。用三字母缩写形式列出其侧链
为如下要求的氨基酸:
(a)含有一个羟基。TyrSerThr
(b)含有一个氨基。ArgAsnGln
(c)含有一个具有芳香族性质的基团。PheTrpTyr
(d)含有分支的脂肪族烃链。Val
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