基因诊断专题知识专家讲座.pptVIP

基因诊断GeneDiagnosis温州医学院检验医学院暨生命科学学院基因诊断专题知识第1页

概论基因诊断专题知识第2页

疾病诊疗常规路径细胞学生化学免疫学表型水平:中晚期出现特异性不强影像学基因诊断专题知识第3页

基因诊疗经过检测基因结构异常或其表示异常,对人体健康状态和疾病做出诊疗方法。★基因诊断专题知识第4页

基因结构异常基因表示异常DNAmRNA蛋白质核酸杂交PCR测序RT-PCR荧光PCRNorthernBlot基因芯片基因芯片WesternBlot组化ELISA蛋白芯片★基因诊断专题知识第5页

与传统诊疗区分:直接以病理基因（致病基因、疾病相关基因和外源性病原生物基因等）为分析对象。基因诊断专题知识第6页

Yuet-WaiKan简悦威1976年加州大学华裔科学家KanYW用核酸分子杂交首次对一例α地中海贫血进行诊疗。基因诊断专题知识第7页

（1）DNA分子杂交技术（2）PCR技术为基础DNA诊疗,尤其是定量PCR和实时PCR应用（3）生物芯片（biochip）技术为代表高通量密集型检测技术发展阶段基因诊断专题知识第8页

发展趋势（1）DNAmRNA.protein（2）单一联合（3）定性定量（4）单基因多基因（5）诊疗预防基因诊断专题知识第9页

基因诊疗惯用诊疗技术PCR核酸杂交基因芯片bDNANASBA测序基因诊断专题知识第10页

实时荧光定量PCR经过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号实时检测从而实现对起始模板定量及定性分析。在实时荧光定量PCR反应中,引入了一个荧光化学物质,伴随PCR反应进行,PCR反应产物不停累计,荧光信号强度也等百分比增加。每经过一个循环,搜集一个荧光强度信号,这么我们就能够经过荧光强度改变监测产物量改变,从而得到一条荧光扩增曲线.基因诊断专题知识第11页

荧光定量标准曲线基因诊断专题知识第12页

常见实时荧光定量PCR方法荧光染料直接与产物结合1.SYBRgreen——特异性结合双链,释放荧光信号荧光标识探针1.Taqman双荧光标识探针2.molecularBeacon荧光标识探针3.荧光标识杂交双探针基因诊断专题知识第13页

SYBR染料在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而确保荧光信号增加与PCR产物增加完全同时。基因诊断专题知识第14页

SYBR-GreenI5’3’5’3’SGExcitationSGSGSGSGEmission实时荧光定量PCR技术原理双链荧光染料基因诊断专题知识第15页

SYBR-GreenI5’3’5’3’SGSGSGSGSGExcitationEmission实时荧光定量PCR技术原理基因诊断专题知识第16页

溶解曲线分析（Tm）特异性问题基因诊断专题知识第17页

实时荧光定量PCR——TaqMan探针法??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????