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产Serpin双杆菌菌株筛选与serpin缺失株的构建
的开题报告
题目：产Serpin双杆菌菌株筛选与serpin缺失株的构建
摘要：
Serpin双杆菌是一种产生Serpin蛋白质的细菌，Serpin蛋白质可以
抑制凝血酶等蛋白酶活性。通过构建serpin缺失的Serpin双杆菌株，可
以研究Serpin蛋白质在细菌生长和代谢中的作用。本研究通过筛选
Serpin双杆菌菌株并进行基因敲除技术，制备serpin缺失的Serpin双杆
菌菌株，进一步深入研究Serpin蛋白质的功能与作用机理。
关键词：Serpin双杆菌，Serpin蛋白质，基因敲除技术，缺失菌株
背景：
Serpin蛋白质是一种抑制蛋白酶活性的蛋白质家族，在细胞内外均
有广泛分布，具有多种功能。Serpin蛋白质通过与蛋白酶结合形成“酶-
抑制剂”复合物而发挥其作用，阻止蛋白酶活性及调控细胞内的信号传
导和代谢等过程。在Serpin蛋白质家族中，antithrombin是一种重要的
蛋白质，它可以抑制凝血酶活性，在凝血系统的调节中具有重要作用。
Serpin蛋白质还可以参与炎症反应、免疫系统调节和肿瘤的发生发展等
生理和病理过程。
在细菌中，也存在着一些Serpin蛋白质，如在两栖动物肠胃的益生
菌拉托伊沙型链球菌（Lactococcuslactissubsp.lactis）中就发现了一种
新的Serpins。Serpin蛋白质在细菌内部的具体功能和作用机理还需要进
一步研究。
研究方法：
1.Serpin双杆菌菌株的筛选：
本研究采用样品分离、基本染色和摄影技术等方法进行菌体形态和
生物学特性的观察。
2.Serpin双杆菌缺失株的构建：
（1）设计缺失菌株的基因编制并进行合成
（2）瞬间电击法将目标序列导入质粒，转化至大肠杆菌中进行扩增
（3）进行PCR扩增并分离纯化序列，最后通过测序鉴定其序列的
准确性
（4）将获得的目标序列用大肠杆菌接种到发酵罐中，发酵30-40个
小时。
预期成果：
成功构建Serpin双杆菌缺失株，揭示Serpin蛋白质在细菌内的作用
机理和代谢调节等方面的新信息，拓宽Serpin蛋白质的研究范畴和应用
前景。
参考文献：
1.YingfangZ,WeiweiZ,SanfridW,etal.Evidenceforhorizontal
transferofaserineproteasegenebetweenbacteriaandinsects[J].BMC
Genomics,2009,10(1):541-541.
2.林麟,樊铭,曹之桐.Serpin蛋白的结构[J].生物化学与生物物理
进展,1998,25(1):67-73.
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