2侵袭性真菌培养诊断指南解读.pptx

侵袭性真菌实验室诊断操作指南解读

中华人民共和国卫生行业标准

XX/T00n一xoo

侵袭性真菌病临床实验室诊断操作规范

OperatingProcadurafoLaheraordiapotlsoflavatheFusgplDisasa

x0X-XX-双发布xX-XX-双实施

本标准由卫生部临床检验标准专业委员会

提出

本标准起草单位：

中国医学科学院北京协和医院

北京大学第一医院

复旦大学附属华山医院

本标准起草人：

徐英春李若瑜余进郭莉娜

章强强张丽

王瑶王贺

范欣

DiagnosticmethodsforIFls

MicrobiologicalNon-microbiological

Serologicmethods

B-Dglucangalactomannan

Conventionalmethods

directmicroscopic

examination

cryptococcal

capsular

polysaccharide

12thESCMIDSummerSchoolProf.GeorgiaVrioni

Non-culture-basedmethods

HistopathologyRadiology

Molecularmethods

culture

PCR

侵袭性真菌感染直接镜检

念珠菌属的形态学特点：直接镜检

·10%KOH直接镜检/染色后镜检：直接镜检法简便、快速、实用

孢子：圆形或卵圆形，外观像酵母菌，革兰氏染色阳性，但着色不均匀

假菌丝/菌丝：假菌丝无隔、无分支，假菌丝节间有明显的狭窄部，某些菌种偶尔可见到分隔的真菌丝，芽孢往往集中于菌丝分隔处

·孢子

·假菌丝

假菌丝

孢子

念珠菌属真假菌丝的问题

·念珠菌属可以出现假菌丝和真菌丝，但并不是所有的念珠菌种都有真假菌丝

念珠菌属的微生物学特点

真菌丝假菌丝芽管

·白念珠菌在组织内常呈菌丝体，与孢子相比，不易被吞噬，因此其致病性增加，其他念珠菌形成菌丝能力弱，故致病力也相对较弱

只有白念珠菌具有产生芽管的能力

光滑念珠菌

不能产生真假菌丝

热带念珠菌

白念珠菌

近平滑念珠菌光滑念珠菌

十

十十

十

十

十

曲霉直接镜检生物学特征

·曲霉的基本结构

菌丝：有隔，多细胞性，有分枝；足细胞(接触培养基的部分，厚壁而膨大)分生孢子梗：从足细胞直立生长

顶囊：孢子梗顶端膨大，半球形或椭圆形

小梗：顶囊上，辐射状，一层或二层杆状

分生孢子：小梗顶端，成串，球形，不同颜色

分生孢子头：菊花样的头状结构分生福子头

·分生孢子头与足细胞是曲霉的特征性结构

分生孢子一

足细胞

顶旋

分生孢子梗-

(1)

闭当光子案子囊稳子

瓶梗梗基

(2)

曲霉菌属的形态学特点：直接镜检

烟曲霉分生孢子头的顶囊烧瓶状，小梗单层，排列成木栅状，

布满顶囊表面3/4,顶端有链形分生孢子，分生孢子球形，有小棘，绿色

黄曲霉分生孢子头顶囊球形或近球形，小梗双层，第一层长，

布满顶囊表面，呈放射状排列，黄色，顶端有链形孢子

黑曲霉分生孢子头的顶囊球形或近球形，小梗双层，第一层粗

大，第二层短小，呈放射状排列，布满整个顶囊，黑色，顶端有链形孢子

土曲霉分生孢子头的顶囊半球形，小梗双层，第一层短，第二层

长，呈放射状排列，分布顶囊表面2/3,顶端有链形孢子

·分生孢子头·顶囊

分生孢子头

圆形或卵圆形，菌体直径2～15μm,革

兰染色阳性

菌体外有宽厚荚膜，荚膜比菌体大1～3倍，折光性强，一般不易染色，常用墨汁负染色法可见圆形的菌体，外绕一较宽阔的空白带(荚膜)

菌体常有出芽，但无真、假菌丝

染色

菌体

荚膜

墨汁

浅灰色

无色层光圈

革兰

深蓝色

淡蓝或不着色

0.1%甲苯胺蓝

紫红色

不着色

姬萨姆

紫蓝色

不着色

HE

橘红或中央空亮

浅红或不着色

PAS

紫红色

红色

侵袭性真菌感染培养诊断

培养基

用途

沙保弱葡萄糖琼脂培养基

真菌的常规培养

马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)

观察真菌菌落色素，用于鉴别真菌

心脑浸液葡萄糖血琼脂

深部真菌培养(二相性真菌)

放线菌酮一氯霉素琼脂

真菌的常规培养

玉米粉聚山梨酯一80琼脂

观察白假丝酵母菌的厚膜孢子

尿素琼脂

用生化反应鉴别真菌

(红色癣菌和石膏样癣菌)

有条件实验室平行接种显色培养基；为抑制细菌生长，培养基中可加入