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专题二十七基因工程和生物技术的安全与伦理
专题检测题组A组
Eco
1.图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程,①~④表示相关的操作。若限制酶R
Bam
Ⅰ识别G↓AATTC,HⅠ识别G↓CATCC。下列选项正确的是()
2+
A.利用PCR技术扩增基因时,反应缓冲溶液中要添加Ca来激活DNA聚合酶
B.构建基因表达载体时可使用E.coliDNA连接酶将DNA片段连接起来
C.农杆菌侵染人参细胞后Ti质粒整合到受体细胞的染色体DNA上
D.检测干扰素基因是否导入人参愈伤组织细胞需要利用抗原—抗体杂交
2+
答案B利用PCR技术扩增基因时,反应体系中一般要添加Mg来激活耐高温的DNA聚合酶,A错误;由
EcoBamE.coli
于RⅠ和HⅠ对目的基因和Ti质粒进行切割产生的是黏性末端,黏性末端可以用DNA连
接酶进行连接,B正确;农杆菌侵染人参细胞后,整合到宿主细胞染色体DNA上的是Ti质粒上的T-DNA
片段,而不是整个Ti质粒,C错误;检测目的基因是否导入受体细胞常用分子杂交技术,D错误。
2.荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量,其原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加
入一个与某条模板链互补的荧光探针,当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处时,会水解探针,使
荧光监测系统接收到荧光信号,即每扩增一次,就有一个荧光分子生成,过程如图所示。下列相关叙述错
误的是()
A.引物与探针均具特异性,与模板结合时遵循碱基互补配对原则
B.反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关
C.若用cDNA作模板,上述技术也可检测某基因的转录水平
D.耐高温的DNA聚合酶催化DNA的合成总是从子链的3端向5端延伸的
答案DPCR中,引物是利用目的基因的一部分已知序列设计出来的,探针也是通过待测序列的一部分
设计出来的,均具有特异性,且二者都是通过碱基互补配对原则与模板结合的,A正确;由题可知,荧光的
产生是荧光探针被水解所致,因此起始时的模板DNA含量越高,与其结合的荧光探针就越多,扩增时水解
的探针越多,荧光就越强,B正确;若用cDNA作模板进行转录,水解特异性荧光探针时会发出荧光,根据
荧光的强度可确定转录水平,C正确;耐高温的DNA聚合酶催化DNA的合成,总是从子链的5端向3端延
伸的,D错误。
3.基因编辑CRISPR/Cas9系统由Cas9蛋白和人工设计的gRNA构成。在gRNA引导下,Cas9与靶序列结
合并将DNA双链切断。通过在Cas9基因中引入突变,获得了只有切割一条链活性的nCas9,可以实现C
→T(G→A)或A→G(T→C)的碱基替换。下列相关说法不正确的是()
...
A.gRNA与靶序列特异性结合遵循碱基互补配对原则
B.利用CRISPR/Cas9系统可以使靶基因发生定点突变
C.可设计gRNA与靶基因的启动子区域互补,从而抑制靶基因复制
D.将CRISPR/Cas9技术应用于人类疾病治疗时,需注意安全性及伦理问题
答案C由图示分析可知,gRNA与靶序列特异性结合遵循碱基互补配对原则,A正确。由题意可知,利
用CRISPR/Cas9系统可以使靶基因实现碱基替换,从而发生定点突变,B正确。启动子位于基因的上游,
它是RN
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