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血细胞形态学讲义
血液和骨髓瑞氏染色形态学检查法通过分析血液和骨髓中有核细胞数量、相对构成比、形态改变,了解骨髓造血功能状态和异常改变的形态学检查方法。
形态学检查方法的价值发现血细胞构成和形态异常了解骨髓造血功能状态对血液病提供确诊依据或提供重要线索是各种血液病形态学检查的基础
形态学检查方法的局限性不能了解骨髓结构不能了解细胞分子生物学特性和功能
骨髓血细胞检查适应症患者多次检查外周血有异常患者有原因未明的肝、脾、淋巴结肿大查明感染的原因查明恶性肿瘤有无转移助诊类脂质沉积病对血液病进行鉴别诊断和疗效观察
(一) 血液和骨髓标本的来源部位:一般在髂前上棘或髂后上棘穿刺,必要时行胸骨穿刺,儿童还可以选择胫骨。骨髓穿刺成功的标志:抽吸骨髓时患者感锐痛,骨髓液外观红色粘稠性、有骨髓小粒、油滴。显微镜下见有骨髓成分(如幼红细胞、幼粒细胞、巨核细胞、浆细胞、网状细胞等)
(二)血液和骨髓标本制作见幻灯
(三)血液和骨髓标本瑞氏染色选择标本:选取长短厚薄适宜的涂片(骨髓2张、血片2张)进行瑞氏染色。染色原理:瑞氏染液含美蓝和伊红两种成分,美蓝偏碱性,与细胞内酸性物质有亲和力(胞浆),染成蓝色;伊红偏酸性,与细胞内碱性物质有亲和力(胞核),染成紫红色浓度: 瑞氏染液:缓冲液=1:2,时间1小时(根据细胞数,室温调整)
偏酸偏合适碱
(四)观察部位的选择
五光学显微镜使用显微镜使用注意事项低倍镜(10倍):判断取材、涂片、染色是否满意,小粒、油滴分级;骨髓增生程度;估计小粒造血细胞面积;计数全片巨核细胞数目;寻找瘤细胞团。油镜下(100倍):观察单个血细胞形态。
第二部分正常血细胞形态
(一)骨髓血细胞分化正常情况下,在造血干细胞分化、发育、成熟的整个演变过程中,存在一定的规律性。造血干细胞逐级分化形成各系列、各阶段的骨髓血细胞,造血干、祖细胞在形态上无法鉴别,只有分化发育为各系列原始、幼稚细胞后,其形态学特征才较明显,才能辨认。
血细胞分化模式(供参考)
1-1 血细胞成熟过程规律胞体:大—小(巨核小—大)胞浆:细胞越幼稚,染色越深;细胞越成熟,染色越浅淡,以胞浆染色判断有核红细胞、粒细胞、巨核细胞成熟度。胞浆染色:深蓝(原始)---蓝色(早幼)---浅蓝(中幼)---粉色颗粒变化:由无颗粒(原始)---噬天青颗粒(早幼)---特异性颗粒(中性粒、嗜酸粒、嗜碱粒)。胞浆量:有少----多
胞核:体积:有大---小,成熟红细胞无核染色质:细致疏松---粗糙紧密快状核膜:不显著---显著核仁:清楚---不清---消失胞核与胞浆体积之比:大----小细胞发育成熟过程:由原始---早幼---中幼---晚幼---成熟细胞
以红细胞系统的成熟过程为例
原始红细胞细胞圆形或椭圆形,直径15—25μm胞核圆形或椭圆形,居中染色质粗颗粒网状,深紫红色,核仁2—3个,胞浆浓(深)蓝色,着色不均,边缘着色深,核周浅染(相当于高尔基体部分和线粒体),无颗粒,有钝伪足。0.03-0.05%
IDA骨髓中原始红(明显核仁及钝伪足)
早幼红细胞圆形,直径15---18μm核圆形,略偏位,染色质开始凝聚,核仁消失或不明显。胞浆量增多,蓝色,核周明亮淡染区,无颗粒。0.92-0.41%
中幼红细胞胞体圆形,直径8—18μm核圆形,居中,或偏位,染色质凝聚小块直至碎墨块状,核周边出现透亮的缝隙。核、浆各占半,浆灰兰色,淡兰色,嗜多色性(碱性核糖体与橙红色血红蛋白混合所致)。7.41-1.91%
中幼红II
晚幼红I
晚幼红II(炭核)
成熟红细胞呈双面凹圆盘形,直径7-8μm,中央为1/3淡染区
原、早、中、晚幼红细胞原始红、早、中、晚幼红比较
巨幼贫(Meg)叶酸、VB12缺乏,骨髓中出现巨幼细胞,分早巨幼红细胞、中巨幼红细胞、晚巨幼红细胞三个阶段,与相对应阶段的正常幼红细胞比,其特点:1胞体大2胞浆丰富3核发育落后于浆,染色质疏松,
中巨幼中巨幼红细胞
晚巨幼晚巨幼红
早巨幼和早幼红鉴别
中巨幼和中巨幼红细胞中巨幼和中幼红
晚巨幼和晚巨幼红细胞晚巨幼和晚幼红
病理情况下成熟红细胞形态
H----J小体径成熟红细胞或幼红细胞胞浆内1个或多个直径1μm暗紫红色小体见于HA.MDS、巨幼贫
球形红细胞小而实心,中心浅染区消失,见于HS。
多嗜性红细胞胞浆灰红或灰兰色,为晚幼红脱核后,反映骨髓造血旺盛,HA时多见,再障时少见。
口形红细胞红细胞中心一条苍白裂隙,似金鱼嘴。
泪滴形红细胞多见于骨髓纤维化。
红细胞大小不均同一患者涂片红细胞大小显著,直径相差2-3倍,多见于
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