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ICS65.020.20
CCSB15
21
辽宁省地方标准
DB21/T3670—2022
花生抗褐斑病鉴定技术规程
Ruleforevaluationofresistancetobrownleafspotinpeanut
2022-12-30发布2023-01-30实施
辽宁省市场监督管理局发布
DB21/T3670—2022
花生抗褐斑病鉴定技术规程
1范围
本文件规定了花生抗褐斑病（CercosporaarachidicolaHori）鉴定技术的病原物分离、接种体制备、
室内抗性鉴定、田间抗性鉴定、病情调查、抗性评价、鉴定记载方法等。
本文件适用于花生（ArachishypogaeaL.）品种及种质资源对花生褐斑病抗性的室内、田间鉴定及
评价。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，
仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本
文件。
NY/T3842东北产区花生生产技术规程
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4缩略语
下列缩略语适用于本文件。
PDA马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PotatoDextroseAgarMedium）
OA燕麦琼脂培养基（OatmealAgarMedium）
5试剂与材料
PDA培养基、OA培养基。
6病原物分离与接种体制备
6.1病原物分离
从花生叶片病斑处挑取花生褐斑病菌分生孢子，置于无菌水中，震荡3min，将分生孢子悬浮液涂
布于水琼脂平板上，挑取单孢子，置于PDA培养基上，26℃培养箱中暗培养。形态观察结合系统进化分
析，鉴定为落花生尾孢菌（CercosporaarachidicolaHori），采用柯赫氏法则测定致病性，确定为供接
种用菌株。病原菌于4℃保存，或20%甘油中，-40℃长期保存。
花生褐斑病症状及病菌形态描述见附录A。
6.2接种体制备
1
DB21/T3670—2022
接种前30d~45d，将病菌接种于PDA培养基平板上，25℃恒温培养15d，挑取菌落，置于2mL离心
管中，加入无菌水1.5mL，充分震荡混匀，吸取菌悬液500μL，置于OA培养基中央，均匀涂布整个平
板，25℃恒温培养10d~15d。于超净工作台中刮取分生孢子，置于装有少量无菌水的烧杯中，静置20min，
5
配制成浓度为1×10个/mL孢子悬浮液（如未立即接种使用，可置4℃保存，保存时间≤2d）。接种前在
孢子悬浮液中加入0.1%Tween201μL/mL增加病菌孢子与叶片粘附性，加入蔗糖0.05mg/mL提高孢子
萌发率。
7室内抗性鉴定
7.1室内离体叶片准备
在花盆中播种籽粒饱满的花生种子3粒，定期浇水，于26℃、12h光暗交替的培养箱中培养至下针
期。剪取底部向上的第3、4片复叶，用脱脂棉包裹叶柄，插入经人工打孔的接种杯（直径4cm，高4.8cm）
中，杯内含清水30mL。
7.2接种
将孢子悬浮液均匀喷施于离体叶片上，光照条件下26℃保湿培养12h，黑暗条件下18℃保湿培养12
h，培养7d~10d。
7.
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