生物制药期末复习答案及题目.pdfVIP

1.生物技术药物（Biotechdrugs)指采用DNA重组技术、单克隆抗体技术或其它

生物新技术研制的蛋白质、抗体或核酸类药物。

2.按生物技术药物的功能用途可以分为三类：治疗药物；预防药物；诊断药物

3.生物技术制药的特征：高技术；高投入；长周期；高风险；高收益

4.制备基因工程药物的基本过程（p16页）：

目的基因的获得：反转录法，反转录-PCR法、化学合成法、筛选基因新方法、

对已发现基因改造。

组建重组质粒；构建基因工程菌；培养工程菌；产物分离纯化；除菌过滤；半成

品检定；成品检定；包装。

5.基因工程技术：将所要重组的目的基因插入载体、拼接、转入新的宿主细胞，

构建成工程菌（或细胞），实现遗传物质的重新组合，并使目的基因在工程菌内

进行复制和表达的技术。

6.目的基因的获得方法

⑴反转录法

①mRNA的纯化②cDNA第一链的合成③DNA第二链的合成④cDNA克隆

⑤将重组体导入宿主细胞⑥cDNA文库的鉴定⑦目的cDNA克隆的分离和鉴定

⑵反转录-PCR法

①cDNA第一链合成②PCR扩增（高温变性→低温退火→适温延生→循环扩增）

③克隆重组分离

⑶化学合成法

⑷筛选基因新方法

⑸对已发现基因的改造

7.真核基因在大肠杆菌中的表达方式

1）以融合蛋白的形式表达药物基因

2）以非融合蛋白的形式表达药物基因

3）分泌型表达蛋白药物基因

8.质粒不稳定分为分裂不稳定和结构不稳定

1

9.提高质粒稳定性的方法：1、分阶段培养法2、在培养基中加入抗生素，形成选

择性压力3、通过温度、PH值、培养基组分、溶解氧的综合调节措施

10.基因工程菌的培养方式:（1）补料分批培养（2）连续培养（3）透析培养（4）

固定化培养

11.细胞融合的方法:（1）病毒诱导融合（2）PEG诱导融合（3）电场诱导融合4）

其它诱导融合

12.细胞融合：两个或两个以上的细胞合并成一个细胞的过程。

13.器材的清洗：一般来说，需经浸泡、刷洗、泡酸和冲洗四个步骤

14.动物细胞的大规模培养主要可分为悬浮培养、贴壁培养和贴壁-悬浮培养（假

悬浮培养）。

15.动物细胞培养的操作方式:分批式操作；半连续式操作；灌流式操作。

16.细胞计数的方法

⑴自动细胞计数器计数

⑵血球计数板计数

4大格中细胞总数

每毫升细胞数=————————————

4×10000×稀释倍数

⑶结晶紫染色细胞核计数

⑷MTT染色计数

17.动物细胞工程制药前景与展望

⑴改进表达载体，提高表达水平和产量

⑵利用代谢工程，改进培养工艺，降低生产成本

⑶抑制细胞凋亡，延长培养周期

⑷采用糖基化工程，提高产品质量

⑸转基因动物的研究

⑹组织工程的研究

2

18.单克隆抗体：由单一杂交瘤细胞克隆分泌的只能识别一种表位（抗原决定簇）

的高纯度抗体。（百科）

19.单克隆抗体及其制备步骤：

⑴抗原与动物免疫

⑵细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养

⑶筛选阳性克隆与克隆化

⑷杂交瘤细胞与抗体性状的鉴定

⑸单克隆抗体的大量制备

⑹单克隆抗体的纯化

20.基因工程抗体类型

①人-鼠嵌合抗体②改形抗体③Fab与Fv抗体④单链抗体⑤单域抗体和

分子识别单位

21.噬菌体抗体库技术的基本方法

①获得目的基因②抗体库技术的载体③淘筛④表达与鉴定

22.植物细胞工程制药的进展与展望

⑴诱导子的应用

植物抗毒素是在植物防御系统内能对抗微生物进攻的某些次级代谢产物，有

些时候连续合成，有些时候在被刺激下才会产生抗毒素，或仅在被诱导下其产量

才能增加。

诱导子是触发形成植物抗毒素信号的物质，根据在细胞内或细胞外形成而将其

分为内源性诱导子和外源性诱导子，根据其来源分为生物诱导子和非生物诱导子

⑵前体喂养

⑶两相培养法

⑷转基因技术应用

⑸植物生物转化技术

23.对生产菌种的要求