2024-2025学年高二生物选择性必修3（人教版）上课课件第1章- 第2节 微生物的培养技术及应用.pptx

第;;微生物;（一）球菌;细菌的芽孢;菌落具有大小、形状、光泽度、颜色、透明度等基本特征。;病毒的繁殖;一微生物的基本培养技术;1.接种工具：;2.涂布器：多用于菌种的分离或微生物平板活菌计数时涂布。;二、基本成分;2.功能;注四：在提供几种主要营养物质外，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。例如，在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。;三、种类;（二）按化学成分;种类;一、含义;三、消毒、灭菌;2.煮沸消毒法;（二）灭菌：强烈的理化方法，杀死物体内外所有微生物（包括芽孢、孢子）;（二）灭菌：强烈的理化方法，杀死物体内外所有微生物（包括芽孢、孢子）;讨论:1．在高压蒸汽灭菌开始以前，为什么要将灭菌锅内的冷空气排尽？;一、培养物与纯培养

;三、酵母菌的纯培养;;（3）倒平板;

①加琼脂的目的是什么?

②在灭菌前,用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的

锥形瓶的目的是什么？

③培养皿能否用高压蒸汽灭菌？

;答：用手触摸锥形瓶，感觉刚刚不烫手时。;2.接种和分离酵母菌

通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。

平板划线的具体操作见下面的流程图：;3.培养酵母菌

通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。

平板划线的具体操作见下面的流程图：;问题讨论;问题讨论;二微生物的选择培养和计数;（2）选择培养基的设计;讨论

如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？

提示：培养基的配方中应含有微生物生长所需的营养要素——碳源、氮源、水、无机盐等。由于绝大多数微生物都能利用葡萄糖，分解尿素的细菌也能利用葡萄糖，可以用葡萄糖作为碳源，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，在培养基中加入尿素提供氮源，使培养基具有了选择作用。该培养基以尿素作为唯一氮源，只允许能以尿素作为氮源的微生物生长。;讨论

2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？

该培养基与普通培养基相比较，共同点是都以有机碳（如葡萄糖）作为碳源，都有水和无机盐；不同点是该培养基以尿素作为唯一氮源，使只有能以尿素作为氮源的微生物生长。

;6支试管，分别加入9ml无菌水;浸;稀释103倍;1.涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第（2）步应如何进行无菌操作？;2.培养基的制作是否合格？;例、平板划线法和稀释涂布平板法接种大肠杆菌的操作中，相同的是（）

①可以用相同的培养基?②都需要使用接种针进行接种③菌液均需稀释后再接种④都可以用来计数活菌⑤依据的原理相同⑥都需要在火焰旁进行接种

A．①②B．③④

C．①⑥D．②④;（1）显微镜直接计数：;（2）间接计数法（活菌计数法）

①常用方法：;思考：活菌计数法统计的菌落数是否与活菌实际数目吻合？为什么？;例：两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。

1、甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230。

2、乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。

你认为这两位同学的做法正确吗？如果有问题，错在哪？;注意事项

①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30—300的平板上进行计数。

②为使结果接近真实值将同一稀释度至少涂布三个平板作重复组，培养计算出菌落平均数。

③统计的菌落往往比活菌的实际数目低，因此，统计结果一般用菌落数来表示。

⑤每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M

其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂

布平板时所用的稀释液的体积(ml)，M代表稀释倍数。;利用选择培养基进行尿素分解菌的分离过程中，从对应稀释倍数为106的培养基中，

A、B两同学分别得到以下两种统计结果。

1、A同学筛选出150个菌落。

2、B同学筛选出50个菌落。

B认为A的培养基被杂菌污染了，或培养基中混入了其他含氮物质，因而导致不能分解尿素的细菌也能在该培养基中生长。A确认自己的操作无误，但也拿不出能令人信服的证据。

;小结：通过这个事例可以看出，实验结果