超敏反应性疾病及其免疫检测.ppt

II型超敏反应免疫学检测项目第31页,共57页，星期六，2024年，5月＋患者红细胞Coombs试剂检测红细胞上不完全抗体直接Coombs试验第32页,共57页，星期六，2024年，5月试管法操作步骤用生理盐水配5%红细胞悬液取洁净小试管2支，1管加1滴5%红细胞悬液，另一管加生理盐水作对照在生理盐水和5%红细胞悬液中分别加入诊断试剂一滴，使其混匀，室温稍待片刻1000r离心1min或3000r离心15s。取出试管先以肉眼观察有无溶血，再轻轻摇动试管，如有凝集，则为阳性结果；如无凝集，应在室温延长15~30min的反应时间，再离心看结果。第33页,共57页，星期六，2024年，5月结果分析生理盐水对照不应发生凝集，为均匀浑浊的乳状液。在红细胞悬液中，如红细胞凝集成片状，边缘皱褶如花边状或边缘松散为阳性。如与对照相同，为阴性。第34页,共57页，星期六，2024年，5月临床意义直接Coombs试验用于检测患者红细胞上不完全抗体，Coombs试验阳性可见于自身免疫性溶血性贫血、冷凝集素综合征、药物诱发的免疫性溶血性贫血、新生儿同种免疫性溶血病、某些高球蛋白血症患者，如系统性红斑狼疮、类风湿、恶性肿瘤等。第35页,共57页，星期六，2024年，5月患者血清靶红细胞致敏红细胞Coombs试剂检测血清中的抗红细胞抗体间接Coombs试验第36页,共57页，星期六，2024年，5月微柱法操作步骤撕开微柱凝胶卡密封纸，标记加1%筛选红细胞50μl及受检者血清25μl37℃孵育15min离心机离心10min，1000r/min观察结果，如红细胞悬浮在反应管顶部或凝胶中，则为阳性结果；反之，如红细胞沉于凝胶底部（管底尖部），则为阴性结果。第37页,共57页，星期六，2024年，5月结果分析-100%的红细胞沉在微管的底部+/-100%的红细胞沉在微管的下端1/3之内1+80%的红细胞沉在微管的下端2/3之内2+80%的红细胞沉在微管的上端2/3之内3+80%的红细胞沉在微管的上端1/3之内4+凝集的细胞全部处于微管的顶部d.p.双群Hemo.溶血反应格局及判断标准第38页,共57页，星期六，2024年，5月临床意义间接Coombs试验用于检测患者游离血清中的不完全抗体。此实验多用于检测母体Rh（D）抗体，以便及早发现和避免新生儿溶血症的发生，亦可对红细胞不相容的输血所产生的血型抗体进行检测。第39页,共57页，星期六，2024年，5月III型超敏反应定义：III型超敏反应是指由可溶性免疫复合物沉积于局部或全身多处毛细血管基底膜，通过激活补体,并在血小板、嗜碱性粒细胞、中性粒细胞等的参与下，引起的以充血水肿、局部坏死和中性粒细胞浸润为主要特征的炎症反应和组织损伤。第40页,共57页，星期六，2024年，5月BloodcellantigenAdsorbeddrugorDrugmetaboliteAntibodytodrugcomplementLysis药物过敏性血细胞减少第41页,共57页，星期六，2024年，5月III型超敏反应特点：1.形成中等大小（106Da）、可溶性（19s）复合物（IC)，IC沉积在血管基底膜上2.IgG,IgM或IgA介导3.补体、中性粒细胞参与4.造成血管及周围组织炎症第42页,共57页，星期六，2024年，5月免疫复合物易于形成与沉积的因素1.抗原成分在体内长期滞留2.血管通透性增强3.组织的解剖学及血流动力学免疫复合物易沉积于静脉压较高及形成涡流的毛细血管迂回处，如肾小球基底膜及关节滑膜、肝、脾、血管等部位。4.免疫复合物的性质中等大小，可溶性免疫复合物?组织内沉积。III型超敏反应第43页,共57页，星期六，2024年，5月第44页,共57页，星期六，2024年，5月Arthus反应及类Arthus反应(局部免疫复合物病)血清病（serumsickness）链球菌感染后肾小球肾炎类风湿性关节炎（rheumatoidarthritis）系统性红斑狼疮（SLE）等临床常见的III型超敏反应性疾病III型超敏反应第45页,共57页，星期六，2024年，5月RA患者手指关节实质性损伤第46页,共57页，星期六，2024年，5月III型超敏反应免疫学检测