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新冠病毒知识点整理原创--第1页
新型冠状病毒与SARS病毒都是依赖病毒表面的S糖蛋白与细胞表面的血管紧张素转换
酶2(ACE2)的结合,侵染细胞,导致疾病的产生。
一、新冠病毒与中心法则
新冠病毒是一种以单股正链RNA(+RNA)作为遗传物质的RNA病毒,其遗传信息的传递过程
如下图:
而HIV虽然也是一种RNA病毒,但它是一种逆转录病毒,遗传信息的传递过程如下图:
拓展:根据RNA能否直接起mRNA作用而分成单股正链RNA病毒(正股RNA病毒)与单股负链
RNA病毒(负股RNA病毒)两种。
正股RNA病毒(如脊髓灰质炎病毒)的单股RNA可直接起mRNA作用,转译早期蛋白质,
包括RNA多聚酶和抑制宿主细胞合成代谢的调控蛋白。负股RNA病毒(如正粘病毒、副粘病
毒、弹状病毒)的单股RNA不能作为mRNA,称为负股,须先合成互补股(正股)作为mRNA,再
转译蛋白分子,而後产生核酸的复制型,成为合成子代病毒RNA的模板。
二、新冠病毒检测
冠状病毒的检测有这样一些方法:(1)核酸检测,即检测病毒的遗侍物质核酸;(2)特
异性抗原蛋白检测,即检测病毒表面的一种糖蛋白;(3)特异性抗体检测,即检测感染者体
内通过免疫反应所产生的某种抗体。如果检测RNA,也要用到PCR技术,当然需要先对RNA
进行逆转录得到对应的cDNA。如果检测抗原蛋白或对应抗体,会涉及抗原、抗体的特异性
结合。
病毒核酸检测,其实就是对病毒的遗传物质RNA进行检测。而针对病毒RNA进行检测的
技术,还可以分两种:一种是实时荧光RT-PCR,一种是病原宏基因组测序(mNGS)。它们
都是用于诊断新冠病毒感染的方法。但核酸检测因为速度快(4~6小时)而应用更多,而基
因测序比较慢(24~72小时),所以用的比较少。
一般对于高度疑似新冠病毒感染、但核酸检测是阴性的病人,会利用基因测序技术进一
步确认。图为《新型冠状病毒肺炎诊疗方案》试行第六版,新型冠状病毒肺炎确诊的病原学
依据。
实时荧光RT-PCR检测是如何让病毒“显形”的?首先要采集样本。由于新冠病毒是通
过呼吸道感染人体,所以样本要从呼吸道采集。目前常规的样本类型大致有2类:一类是用
咽拭子、鼻拭子在人的上呼吸道(咽部或鼻腔)擦拭采集;另一类是收集下呼吸道痰液、支
气管灌洗液、肺泡灌洗液等。采集到的样本将被严格封存,送到实验室。那里是检测员让病
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新冠病毒知识点整理原创--第2页
【例题1】
答案:A
1.实时荧光RT-PCR
①提取病毒的RNA。先从样本中提取出病毒的RNA。具体来说,就是在样本中加入核酸
提取试剂,把病毒破坏,让核酸释放出来。提取病毒核算必须在高级别的生物安全柜内完成。
②把病毒RNA“反转录”成cDNA。通过反转录技术(RT),把病毒的RNA“反转”成
一种特异DNA,即cDNA(因为病毒RNA结构不稳定,所以把病毒RNA转换成稳定的cDNA会
更方便检测)。这里会用到核酸检测试剂盒中一种叫“反转录酶”的物质。而完成转录后,
所有工作都将围绕cDNA展开。
③进行cDNA的扩增与检测。简单说就是扩增cDNA的数量。这里应用的就是PCR,全
称聚合酶链式反应。具体来说,就是借助试剂盒中一些特殊物质,让cDNA不断复制,使其
数量呈指数式增长。所谓RT-PCR,就是将RNA的反转录(RT)和cDNA的扩增(PCR)相结
合的技术。
当cDNA扩增的同时,试剂盒中
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