1.1DNA重组技术的基本工具(讲课).ppt

专题1.基因工程别名：操作环境：原理：操作水平：结果：一、限制性核酸内切酶

4、限制酶的特点如：GAATTCCCCGGGCTTAAGGGGCCC1、在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（）同种限制酶B.两种限制酶同种连接酶D.两种连接酶DNA聚合酶AAATTTGGGGCCCATCCTAGGCTGCT4DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键E·coliDNA连接酶用途DNA连接酶DNA聚合酶将单个核苷酸连接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯键在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键作用对象DNA复制基因重租DNA连接酶与DNA聚合酶比较限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶解旋酶的作用部位在哪里？磷酸二酯键氢键复习解旋酶下一个问题AAATTTGGGGCCCATCAGCTCGT解旋酶氢键AAATTTGGGGCCCATCCAGTCGT解旋酶氢键AAATTTGGGGCCCATCCAGTCGT解旋酶氢键断裂2、载体必须具备的条件：①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存；②具有一至多个限制酶切点，以便与外源基因连接；③具有某些标记基因，供重组DNA的鉴定和选择；④对受体细胞无害。三、基因进入受体细胞的载体

——“分子运输车”1、作用：将外源基因送入细胞。3、常用的载体：质粒，λ噬菌体的衍生物，动植物病毒等。有标记基因有切割位点能复制并带着插入的目的基因一起复制质粒本质：小型环状DNA分子。分布：许多细菌、酵母菌等生物例题：根据下面实验原理和材料用具，设计实验选择运载体——质粒，探究质粒的抗菌素基因所合成的抗菌素类别。

实验原理：作为运载体的质粒，须有标记基因，这一标记基因是抗菌素抗性基因。故凡有抗菌素抗性的细菌，其质粒才可能用作运载体。

材料用具：青霉素、四环素的10万个单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱。

方法步骤：

第一步：取三个含细菌培养基的培养皿并标1、2、3号，在酒精灯旁，用三支注射器，分别注入1亳升蒸馏水、青霉素、四环素液，并使之分布在整个培养基表面。

第二步：将接种环在酒精灯火焰上方灼烧灭菌，并在酒精灯火焰旁取种，然后对三个培养皿接种。

第三步：将接种后的三个培养皿放入37度的恒温箱中培养24小时。

质粒选择实验的探究预期结果分析：

（1）设置1号的目的是，出现的现象是

。（2）如果1、2、3号培养皿的细菌都正常生长说明：如果1、2号培养皿的细菌能正常生长，3号培养皿的细菌不能正常生长则说明:;如果1、3号培养皿的细菌能正常生长，2号培养皿的细菌不能正常生长则说明:

如果只有1号培养皿的细菌能正常生长，2、3号培养皿的细菌都不能正常生长则说明:细菌能正常生活。细菌的质粒上既有抗青霉素基因也有抗四环素基因；此细菌的质粒上有抗青霉素基因但无抗四环素基因；此细菌的质粒上既无抗青霉素基因也无抗四环素基因。此细菌的质粒上有抗四环素基因但无抗青霉素基因；对照反馈练习：***我们与一般的鱼不同哦，我们是能发光的鱼！我们是基因工程的产物。想知道科学家对我们做了什么吗？基因工程的产物基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术或基因拼接技术。基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因重组DNA分子水平定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种。含氮碱基磷酸脱氧核糖DNA的结构（1）基本单位——脱氧核糖核苷酸（