《乳腺癌类器官药物敏感性检测指导患者精准治疗技术规范》.docx

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FORMTEXT11.020

CCS

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FORMTEXTC05

团体标准

T/FORMTEXTFDSAFORMTEXTXXX—FORMTEXT2024

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FORMTEXT乳腺癌类器官药物敏感性检测指导患者精准治疗技术规范

FORMTEXTTechnicalspecificationforprecisiontreatmentofpatientsguidedbydrugsensitivitytestingofbreastcancerlikeorgans

FORMTEXT2024-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX发布

FORMTEXT2024-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX实施

FORMTEXT中国食品药品企业质量安全促进会??发布

STYLEREF标准文件_文件编号T/FDSAXXX—2024

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乳腺癌类器官药物敏感性检测指导患者精准治疗技术规范

范围

本文件规定了乳腺癌类器官药物敏感性检测的样本采集与处理、类器官建立与培养、药物敏感性检测、结果解读与精准治疗建议。

本文件适用于乳腺癌类器官药物敏感性检测和指导治疗乳腺癌患者。

规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

乳腺癌类器官breastcancerlikeorgan

利用乳腺癌患者的肿瘤组织或细胞，在体外三维培养条件下形成的具有类似原生组织结构的三维细胞团，能够模拟原生肿瘤组织的生理和病理特性。

药物敏感性检测drugsensitivitytesting

一种通过实验方法评估特定药物对乳腺癌类器官生长或活性的抑制作用，从而预测该药物对患者肿瘤可能的治疗效果。

样本采集与处理

样本采集

采集对象应为确诊为乳腺癌的患者，在符合医学伦理和患者知情同意的前提下进行样本采集。

通过手术或穿刺活检获取新鲜的乳腺癌组织样本。采集过程中应严格遵守无菌操作规范，避免样本污染。

根据实验需求采集足够量的样本，确保后续类器官培养和药物敏感性检测的顺利进行。

样本处理

将采集到的乳腺癌组织样本按照以下步骤进行处理：

初步处理：将组织样本立即放入含有适量培养基或保存液的无菌容器中，以保持细胞的活性；

清洗与消毒：用无菌生理盐水或PBS缓冲液轻轻冲洗样本，去除表面的血迹和污染物。避免使用刺激性强的化学消毒剂；

切割与消化：将组织样本切割成小块，便于后续的消化和分离。使用适宜的消化酶（如胰蛋白酶、胶原酶等）在37℃下进行消化，直至组织块分散成单个细胞或细胞团；

细胞悬液制备：消化完成后，通过离心去除消化液，加入适量的培养基重悬细胞，制备成单细胞悬液，用于后续的类器官培养。

质量控制与记录

在样本处理过程中和处理后，应进行细胞活性检测（如台盼蓝染色法），确保细胞的活力和数量满足实验要求。

对处理后的细胞悬液进行微生物污染检测，确保无细菌、真菌等污染。

详细记录样本的采集时间、地点、患者信息等，以及样本处理过程中的关键步骤和参数，确保实验的可追溯性和重复性。

类器官建立与培养

细胞接种与基质准备

基质胶准备

选择适宜的基质胶，如Matrigel或其他生物工程基质，用于模拟体内微环境，并为类器官的形成提供支持。

细胞接种

将处理好的乳腺癌细胞或细胞团接种在基质胶上，确保细胞分布均匀，密度适中。

培养条件设置

培养基

根据乳腺癌类器官的生长需求，选择含有必需营养成分、生长因子和激素的培养基。

环境条件

维持培养环境的温度在37°C，CO2浓度为5%，并保持适宜的湿度，以模拟体内生理条件。

换液与观察

定期更换培养基，以去除代谢产物和补充营养物质。同时，定期观察类器官的生长情况，记录形态变化、增殖速率等关键指标。

类器官形成与监测

在接种后，持续监测细胞在基质胶中的生长和分化情况，直至形成具有三维结构的类器官。

定期使用显微镜观察类器官的形态学特征，确保其结构与原生乳腺癌组织相似。

培养周期与传代

根据类器官的生长速度和实验需求，设定合理的培养周期。

当类器官生长到一定程度时，进行传代操作，即将类器官分散成单个细胞或小块，重新接种到新的基质胶上继续培养。

培养过程中的质量控制

定期对培养物进行污染检测，确保无细菌、真菌或其他微生物的污染。

详细记录类器官的生长情况，包括形态学变化、生长速度等，以便后续分析。

药物敏感性检测

检测原理

药物敏感性检测基于类器官对药物的反应来评估其疗效。通过检测药物对乳腺癌类器官生长、增殖或凋亡的影响，预测该药物对患者的可能疗效。

实验准备

药物选择

根据临床需