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关于细胞毒性实验及共聚焦成像，你还需要了解这些！

细胞毒性实验是一种在离体状态下模拟生物体生长环境，检测医

疗器械及生物材料接触机体组织后所发生的细胞溶解、抑制细胞生长

和其他毒性作用的体外试验。可在短时间内较经济、简便地筛选出批

量供试品的细胞毒性，它为动物试验的进行与否提供了先决条件，对

新型医疗器械及生物材料的研制和应用提供了重要保证。

常用MTT法或者CKK-8法检测，另外也可以通过Live/dead双

染色法进行细胞成像，更直观的记录细胞存活情况。

一、MTT法

1.原理

活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性

的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。

二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在特定

波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。

2.特点

灵敏度高、经济；由于MTT经还原所产生的甲瓒产物不溶于水，

需被溶解后才能检测。这不仅使工作量增加，也会对实验结果的准确

性产生影响，而且溶解甲瓒的有机溶剂对实验者也有损害。

3.应用

3.1含壳聚糖纳米颗粒(CSNP)的聚乙烯醇(PVA)纳米纤维和载药的

氧化石墨烯-磁铁矿(GO-Fe3O4)纳米复合材料，用于烧伤和糖尿病创

面的智能敷料[1]

MajidAbdouss研究团队采用静电纺织法制备了含壳聚糖纳米颗

粒(CSNP)的聚乙烯醇(PVA)纳米纤维和载药的氧化石墨烯-磁铁矿(GO-

FeO)纳米复合材料，用于烧伤和糖尿病创面的智能敷料。壳聚糖纳

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米颗粒和GO-FeO纳米复合材料作为载体存在于纳米纤维中，调节

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了药物在纳米纤维膜中的释放。在释放的早期，GO的存在阻止了突释，

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而磁铁矿的存在可以刺激伤口愈合。此外，纳米纤维膜对革兰氏阳性

菌和革兰氏阴性菌均具有良好的抗菌性能。

P80CN20-TGT2、P80GF5-T-GT2和P80CN20GF5-T-GT2纳米

纤维膜的细胞毒性和细胞存活率分别为83.25±2.87%、98.69±0.60%

和82.23±1.56%。壳聚糖纳米颗粒与GO-FeO纳米复合材料所形成

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的纳米纤维膜具有低毒性。

3.2FeCo-PEI-PLA-PEG-FA/Glu(NPsAB)纳米颗粒用于基因治疗

和化疗[2]

耐药是化疗药物治疗癌症的一大挑战。在这场战斗中，使用

siRNA给药是一种有效的策略。HosseinAliEbrahimi研究团队将

siRNA和紫杉醇(PTX)整合到一种纳米载体中，通过将叶酸(FA)和葡

萄糖(Glu)偶联到载体表面，优化了载体对肿瘤组织的选择性。以

FeCo-PEI纳米粒子和聚乳酸-聚乙二醇(PLA-PEG)共聚物为载体，构建

了纳米载体结构。与NPA/siRNA/PTX和NPsB/siRNA/PTX相比，