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第四节原核生物与真核生物

DNA复制特点;一、原核生物DNA复制特点;1.DNA双螺旋解旋;DNA复制时,双链首先解开,形成复制叉,复制叉形成过程有各种酶和蛋白质参与。将主要酶和蛋白质简介下列。;SSB蛋白可牢固地结合在单链DNA上,在原核生物中表现出协同效应,如第一个SSB蛋白结合到DNA上去能力为1,第二个SSB蛋白结合能力则高达103。SSB蛋白作用是确保被解链酶解开单链在复制完毕前能保持单链结构,它以四聚体形式存在于复制叉处,待单链复制后才掉下,重新循环。因此,SSB蛋白只保持单链存在,并不起解链作用。;2)DNA解链酶(DNAhelicase);DNA解链过程;2.冈崎片段与半不连续复制;3.DNA复制引起与终止;4.DNA聚合酶;第11页;DNA聚合酶I不是复制大肠杆菌染色体主要聚合酶,它有5’→3’核酸外切酶活性,确保了DNA复制准确性。它也可用来除去冈崎片段5端RNA引物,使冈崎片段间缺口消失,确保连接酶将片段连接起来。

;DNA聚合酶II活性很低,若以每分钟酶促核苷酸掺入DNA转化率计算,只有DNA聚合酶I5%,因此也不是复制中主要酶。当前认为DNA聚合酶II生理功效主要是起修复DNA作用。

;DNA聚合酶III包含有7种不同亚单位和9个亚基,其生物活性形式为二聚体。它聚合活性较强,为DNA聚合酶I15倍,聚合酶II300倍。它能在引物3’—OH上以每分钟约5万个核苷酸速率延长新生DNA链,是大肠杆菌DNA复制中链延长反应主导聚合酶。;5.DNA连接酶;二、真核生物DNA复制特点;三、DNA复制调控;1.大肠杆菌染色体DNA复制调控;2.ColE1质粒DNA复制;3.真核细胞DNA复制调控;另外,真核生物复制起始还包括转录活化、复制起始复合物合成和引物合成等阶段,许多参与复制起始蛋白功效与原核生物中类似。

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