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高三一轮复习——动物细胞培养和核移植技术
一.教学内容:
动物细胞培养和核移植技术
二.学习内容:
本周学习动物细胞培养的过程,要区别开较动物细胞培养与植物
组织培养异同点,掌握动物体细胞核移植技术的过程和意义
三.学习重点、难点
了解动物细胞培养的过程。
了解动物体细胞核移植技术的原理。
四.学习过程:
(一)学习内容
1.动物细胞培养:胞培养是指细胞在体外条件下的生长,动物细
胞在培养的过程中不再形成组织。
概念:从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然
后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
培养液的成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
动物细胞培养成功的关键在于培养液中是否含有动物血清,因为由于
动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入动
物血清以提供一个类似生物体内的环境,此外动物血清中也包含了一
些动物的激素和酶,可以促进细胞的发育。
培养液的特点:液体培养基、含动物血清。
培养的条件:无菌、无毒的环境;营养物质(合成培养基);温
度和pH(36.5±0.5℃,7.2~7.4);气体环境(氧气和二氧化碳,动
物细胞培养中将培养皿或松盖培养瓶置于95%空气加5%CO的混合
2
气体的培养箱中进行培养。)等。
基本过程:
取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎,并用胰蛋白酶
处理(消化),处理形成单个细胞,将单个的细胞放入培养基中配成
一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,成
为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时,细胞就会停止分裂
增殖,出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋
白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。
传代培养与原代培养:我们将培养10代以内的培养称为原代培养。
10代以后的称为传代培养。培养10~50代的细胞称为细胞株。当培养
超过50代时,大多数的细胞已经衰老死亡,但仍有部分细胞发生了遗
传物质的改变出现了无限传代的特性,即癌变。此时的细胞被称为细
胞系。
技术的应用:a.生物制品的生产b.转基因动物的培养c.检测有毒
物质d.医学研究
2.动物细胞培养与植物组织培养的区别。
动物细胞培养与植物组织培养有许多相似之处,也有许多不同点。
一是它们用的培养基不同,植物组织培养用的一般是固体培养基,而
动物细胞培养用的一般是液体培养基。第二是它们的培养基的成分不
同。动物细胞培养的培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐和维
生素,另外还有动物血清。植物组织培养所需要的培养基包含植物生
长和发育的全部营养成分,如矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和
有机添加物,没有动物血清。第三是植物组织培养最后一般得到新的
植物个体,而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性,
因此得到的是同一种的细胞。
区别:
a.培养基不同:植物细胞(固体培养基),动物细胞(液体培养
基)
b.培养基的成分不同:动物细胞培养必须利用动物血清,植物组
织培养则不需要。
c.产物不同:植物组织培养最后一般得到新的植物个体,而动物
细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性,因此得到的是同一
种的细胞。
3.细胞核移植:将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中,使后者
不经过精子穿透等有性过程即无性繁殖即可被激活、分裂并发育成新
个体,使得核供体的基因得到完全复制。以供体核的来源不同可分为
胚细胞核移植与体细胞核移植两种。
哺乳动物核移植是将外源的一个细胞核与一个去核卵母细胞结合,
产生遗传上同质的动物的技术。它在动物育种、制备转基因动物、基
因治疗及器官移植等方面具有重大的作用。
A.供体核的获得:供体核可以是早期胚胎细胞、胚胎千细胞和体
细胞。
早期都采用合子核到64细胞期的胚胎细胞核质体分裂球作供体细
胞核。
80年代开始,胚胎干细胞在核移植,但其建系太困难,仅在小鼠
上获得成功。胚胎干细胞系克隆小鼠,有29%的重构胚在
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