核酸检测实验室污染原因及最权威处理方案.pdf

目前国内所有二级以上综合医院都具备了核酸检测能力，大部分医院

也设立了PCR实验室，高强度的核酸检测任务己然成为了我们检验人

的工作常态，但是，如果一旦出现实验室污染，可能会造成假阳性结果，

导致结果不可信，甚至可能会危及实验室工作人员安全。应对核酸检测

实验室污染的最好办法就是防范于未然，今天就带大家了解一下实验中

我们如何避免和减少污染的产生以及处理污染。

一、污染的产生

在新冠病毒核酸检测过程中，常见以下几种污染类型:扩增片段的污染

（产物污染）；天然基因组DNA的污染、试剂污染（贮存液或工作液）

以及样本间交叉污染。核酸检测实验室污染的主要来源是扩增产物的污

染。

实验室应通过以下途径及时发现污染:

、采用每次检测过程至少个阴性对照随机置于临床样木中间参与提

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取全过程。

2、每天对实验室内空气进行采样监测。空气监测范围应至少应包括样

木制备区和扩增产物分析区。

3、定期对实验室台面、门把手、仪器设备表面进行取样监测。

4、阳性样本采用另外一到两种更为灵敏且扩增不同区域的核酸检测试

剂对原始样木进行复核检测。

二、污染的防控

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严格实验室功能分区

原则上新冠病毒核酸检测实验室应当设置以下区域：试剂储存和准备区、

样本制备区、扩增和产物分析区。

根据使用仪器的功能，区域可适当合并。各区域在物理空间上应当是完

全相互独立的。传递窗满足密封性要求，不能有空气的直接相通。各项

检测工作应严格按相应规定在各自的区域内进行，严禁在样本制备区配

制试剂。

各区的功能是：

1、试剂储存和准备区：贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合

液的制备，以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。

2、样本制备区：转运箱的开启，样本的灭活（适用时），核酸提取及

其加入至扩增反应管等。

3、扩增和产物分析区：核酸扩增和产物分析。

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确保实验室人、物及空气单向流动

核酸检测实验室的人、物及空气流向按照试剂储存和准备区f样木制备

区f扩增和产物分析区，防止扩增产物随人流、物流及空气进入扩增前

的区域。空气流向应按照从试剂储存和准备区f样木制备区f扩增区f

扩增产物分析区方向空气压力递减的方式进行。

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实验室检测安全管理

(1)基本要求

核酸检测应当在生物安全二级实验室进行，并应在生物安全风险评估的

基础上，采取适当的个体防护措施，包括手套、口罩和隔离衣等。开展

新冠病毒核酸检测的实验室应当制定实验室生物安全相关程序文件及实

验室生物安全操作失误或意外的处理操作程序，并有记录。

(2)实验室前安全要求

应使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行桌而、台面及地面消毒。消毒液

需每天新鲜配制，不超过24小时。转运至实验室的标木转运桶应在生

物安全柜内开启。转运桶开启后，使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精对转

运桶内壁和标木采集密封袋进行喷洒消毒。取出标本采集管后，应首先

检查标本管外壁是否有破损、管口是否泄露或是否有管壁残留物。确认

无渗漏后，推荐用0.2%含氯消毒剂喷洒、擦拭消毒样品管外表而(此处

不建议使用75%酒精，以免破坏标木标识)。如发现渗漏应立即用吸水

纸覆盖，并喷洒有效氯含量为0.55%的含氯消毒剂进行消毒处理，不得

对标本继续检测操作，做好标木不合格记录后需立即进行密封打包，压

力蒸汽灭菌处理后销毁。

如为采样管为非灭活管，实验室操作人员在进行标本热灭活时，温浴前

需旋紧标木采集管管盖，必要时可用封口膜密闭管盖；温浴过程中可每

隔分钟将标木轻柔摇匀次，以保证标本均匀灭活；温浴后标本需

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静置至室温至少10分钟使气溶胶沉降，随后再开盖进行后续核酸提取。

(3)核酸提取和检测安全要求

标木进行核酸提取和检测时应尽可能在生物安全柜内进行操作。如为打

开标木管盖或其他有可能产生气溶胶的操作，则必须在生物安全柜内进

行。

(4)实验室结束后清洁要求。

需要对实验室环境进行清洁，消除可能的核酸污染。

①实验室空气清洁。实验室每次检测完毕后，可采用房间固定和/或可

移动紫外灯进行紫外照射小时以上。必要时可采用核酸清除剂等试剂

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