一种批量提取水稻胚乳DNA的方法.pdfVIP

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一种批量提取水稻胚乳DNA的方法--第1页

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN103436524A

(43)申请公布日2013.12.11

(21)申请号CN201310238655.8

(22)申请日2013.06.17

(71)申请人华南农业大学

地址510642广东省广州市天河区五山路483号

(72)发明人郭涛罗文龙陈志强王慧陈海英刘永柱张建国

(74)专利代理机构广州粤高专利商标代理有限公司

代理人谢敏楠

(51)Int.CI

C12N15/10

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

一种批量提取水稻胚乳DNA的方

(57)摘要

本发明涉及生物技术领域,公开了

一种批量提取水稻胚乳DNA的方法。该方

法包括如下步骤:S1.从水稻种子中切取胚

乳;S2.将胚乳投入PCR板(T1板)孔

中;S3.T1板每孔加入碱液,放入PCR仪

中进行加热;S4.取出T1板,每孔投入钨

合金珠及1×DNA抽提液;S5.将T1板重新

一种批量提取水稻胚乳DNA的方法--第1页

一种批量提取水稻胚乳DNA的方法--第2页

置于PCR仪中进行加热;S6.取出T1板,

振动;S7.将T1板放入离心机进行离心;

S8.取出T1板,将上清液转移至另一PCR

板(T3板)中,T3板每孔中预先加入双蒸

水;S9.将T3板置于冰箱中保存。该方法

快速、操作简单,可实现水稻胚乳DNA的

批量提取。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

一种批量提取水稻胚乳DNA的方法--第2页

一种批量提取水稻胚乳DNA的方法--第3页

权利要求说明书

1.一种批量提取水稻胚乳DNA的方法,其特征在于,包括如下步骤:

S1.从水稻种子中切取胚乳;

S2.将胚乳投入PCR板孔中,所述的PCR板命名为T1板;

S3.T1板每孔加入50~150μL碱液,放入PCR仪中进行加热;

S4.取出T1板,每孔投入钨合金珠及150~250μL1×DNA抽提液;

S5.将T1板重新置于PCR仪中进行加热;

S6.取出T1板,振动3~4min;

S7.将T1板放入离心机进行离心;

S8.取出T1板,将上清液转移至另一PCR板中,PCR板命名为T3板,T3

板每孔中预先加入50~150μL双蒸水;

S9.将T3板置于冰箱中保存;

S4中1×DNA抽提液的组成为pH9.5的Tris、EDTA、KCl,它们的摩尔比为

5~15:0.5~1.5:50~150。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,S1中所述从水稻种子中切取

一种批量提取水稻胚乳DNA的方法--第3页

一种批量提取水稻胚乳DNA的方法--第4页

胚乳是指从每粒水稻种子切取1/3的胚乳。

3.根据权利要求1所述的方

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