猴痘病毒实验室检测技术指南.pdf

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猴痘病毒实验室检测技术指南

为指导各级疾控部门和其他相关机构规范开展猴痘病

毒实验室检测工作,快速、准确识别猴痘确诊病例,制定本

指南。本指南主要介绍标本采集以及猴痘病毒核酸荧光定量

PCR检测方法、生物安全要求等内容。

一、检测对象

(一)猴痘确诊病例和疑似病例;

(二)密切接触者;

(三)感染或疑似感染猴痘病毒的动物;

(四)环境或其它生物材料。

二、技术人员基本要求

(一)采样人员。从事猴痘病毒核酸检测标本采集的技

术人员应当经过生物安全培训,培训合格后方可从事采样工

作。采样人员应熟悉采集标本种类和采集方法,熟练掌握标

本采集操作流程及注意事项,做好标本信息记录,确保标本

质量符合要求、标本及相关信息可追溯。

1.采样人员个人防护装备要求:KN95/N95及以上级别

的口罩、防护面屏或护目镜、一次性隔离衣、一次性乳胶手

套(尽可能戴两层)、靴套;如果接触了病例血液、体液、

分泌物或排泄物,应及时更换手套。污水采样人员可根据实

际工作需要,适当降低防护级别。

1

2.住院病例的标本由所在医院医护人员采集,根据实

验室检测工作的需要,可结合病程多次采样。

3.密切接触者标本由当地疾控机构或医疗机构专业人员

采集。

4.感染或疑似感染猴痘病毒的动物由当地疾控机构协调

动物疫控部门专业采样人员负责采集。

5.环境或其它生物材料标本由相关专业采样人员负责采

集。

(二)检测人员。实验室检测技术人员应具备相关专业

大专以上学历或具有中级及以上专业技术资格,并有2年以

上实验室工作经历,接受过核酸检测相关培训,培训合格后

方可从事检测工作。实验室配备的工作人员数量应与所开展

检测项目及标本量相适宜,确保能够及时、熟练、准确地开

展实验室检测和报告结果。

三、标本采集、保存和运输

(一)标本采集种类。

1.首选标本是皮肤(黏膜)病变部位标本,包括病变表

面拭子、痘疱液或痘疱渗出物拭子、痘痂或痘痂拭子等。

2.呼吸道标本,如口咽拭子,可用于病例急性期检测,

也是密切接触者检测最常用标本。

3.发病急性期可采集EDTA抗凝血标本进行核酸检测。

2

4.采集发病后7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)

双份血清用于抗体检测。

5.直肠拭子、尿液、精液、唾液等其它标本仅用于研究,

根据工作需要采集。

6.污水或其它环境生物材料标本根据实际工作需要进行

采集。

(二)标本采集要求。

采集皮肤(黏膜)病变部位标本时应使用无菌聚酯纤维、

尼龙或类似材质拭子,避免使用棉拭子。采集疑似病例的标

本前应避免使用75%乙醇等消毒剂清洁病变部位。每种类型

的皮肤(黏膜)病变应尽可能采集两个以上拭子,每个病例

应同时采集身体不同部位或外观不同的2-3种病变标本。采

集皮肤(黏膜)病变部位标本时应适当用力。皮肤(黏膜)

病变部位、痘痂或分泌物等不同拭子标本应放置于不同的采

样管中。进行病毒分离时应采集干拭子标本(无采样液)或

以非灭活型病毒采样液保存。根据实验室活动资质确定使用

非灭活型或灭活型采样液采集标本。

(三)标本采集方法。

1.斑疹、丘疹、水疱或脓疱等皮肤(黏膜)病变部位标

本:一手紧握采样拭子尾部,手与拭子头部保持一寸以上距

离。采样时适当用力下压拭子,在皮损表面来回擦拭至少2-3

次,然后以拭子另一面再重复擦拭2-3次。如果在擦拭过程

3

中痘疱破裂,要确保采集到痘疱液。采样后将拭子放置于无

菌采样管中(可含病毒采样液或不含液体),折断拭子头,

去除拭子尾部,盖上管盖,以消毒纸巾擦拭消毒采样管,以

封口膜密封管盖后将采样管保存或送检。

2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本:采样前应确保实验室

可检测此类标本。使用无菌镊子或其他钝头器械夹取全部痘

痂或面积至少4mm×4mm

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