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猴痘病毒实验室检测技术指南
为指导各级疾控部门和其他相关机构规范开展猴痘病
毒实验室检测工作,快速、准确识别猴痘确诊病例,制定本
指南。本指南主要介绍标本采集以及猴痘病毒核酸荧光定量
PCR检测方法、生物安全要求等内容。
一、检测对象
(一)猴痘确诊病例和疑似病例;
(二)密切接触者;
(三)感染或疑似感染猴痘病毒的动物;
(四)环境或其它生物材料。
二、技术人员基本要求
(一)采样人员。从事猴痘病毒核酸检测标本采集的技
术人员应当经过生物安全培训,培训合格后方可从事采样工
作。采样人员应熟悉采集标本种类和采集方法,熟练掌握标
本采集操作流程及注意事项,做好标本信息记录,确保标本
质量符合要求、标本及相关信息可追溯。
1.采样人员个人防护装备要求:KN95/N95及以上级别
的口罩、防护面屏或护目镜、一次性隔离衣、一次性乳胶手
套(尽可能戴两层)、靴套;如果接触了病例血液、体液、
分泌物或排泄物,应及时更换手套。污水采样人员可根据实
际工作需要,适当降低防护级别。
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2.住院病例的标本由所在医院医护人员采集,根据实
验室检测工作的需要,可结合病程多次采样。
3.密切接触者标本由当地疾控机构或医疗机构专业人员
采集。
4.感染或疑似感染猴痘病毒的动物由当地疾控机构协调
动物疫控部门专业采样人员负责采集。
5.环境或其它生物材料标本由相关专业采样人员负责采
集。
(二)检测人员。实验室检测技术人员应具备相关专业
大专以上学历或具有中级及以上专业技术资格,并有2年以
上实验室工作经历,接受过核酸检测相关培训,培训合格后
方可从事检测工作。实验室配备的工作人员数量应与所开展
检测项目及标本量相适宜,确保能够及时、熟练、准确地开
展实验室检测和报告结果。
三、标本采集、保存和运输
(一)标本采集种类。
1.首选标本是皮肤(黏膜)病变部位标本,包括病变表
面拭子、痘疱液或痘疱渗出物拭子、痘痂或痘痂拭子等。
2.呼吸道标本,如口咽拭子,可用于病例急性期检测,
也是密切接触者检测最常用标本。
3.发病急性期可采集EDTA抗凝血标本进行核酸检测。
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4.采集发病后7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)
双份血清用于抗体检测。
5.直肠拭子、尿液、精液、唾液等其它标本仅用于研究,
根据工作需要采集。
6.污水或其它环境生物材料标本根据实际工作需要进行
采集。
(二)标本采集要求。
采集皮肤(黏膜)病变部位标本时应使用无菌聚酯纤维、
尼龙或类似材质拭子,避免使用棉拭子。采集疑似病例的标
本前应避免使用75%乙醇等消毒剂清洁病变部位。每种类型
的皮肤(黏膜)病变应尽可能采集两个以上拭子,每个病例
应同时采集身体不同部位或外观不同的2-3种病变标本。采
集皮肤(黏膜)病变部位标本时应适当用力。皮肤(黏膜)
病变部位、痘痂或分泌物等不同拭子标本应放置于不同的采
样管中。进行病毒分离时应采集干拭子标本(无采样液)或
以非灭活型病毒采样液保存。根据实验室活动资质确定使用
非灭活型或灭活型采样液采集标本。
(三)标本采集方法。
1.斑疹、丘疹、水疱或脓疱等皮肤(黏膜)病变部位标
本:一手紧握采样拭子尾部,手与拭子头部保持一寸以上距
离。采样时适当用力下压拭子,在皮损表面来回擦拭至少2-3
次,然后以拭子另一面再重复擦拭2-3次。如果在擦拭过程
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中痘疱破裂,要确保采集到痘疱液。采样后将拭子放置于无
菌采样管中(可含病毒采样液或不含液体),折断拭子头,
去除拭子尾部,盖上管盖,以消毒纸巾擦拭消毒采样管,以
封口膜密封管盖后将采样管保存或送检。
2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本:采样前应确保实验室
可检测此类标本。使用无菌镊子或其他钝头器械夹取全部痘
痂或面积至少4mm×4mm
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