气相色谱定量分析方法的建立步骤.pdf

在实际工作中，当拿到一个样品，该怎样如何定性和定量，建立一套完整的分析方法是关键，

一些常规的步骤：

1、样品的来源和预处理方法

GC能直接分析的样品必须是气体或液体，固体样品在分析前应当溶解在适当的溶剂中，而

且还要保证样品中不含GC不能分析的组分（如无机盐），可能会损坏色谱柱的组分。这样，

我们在接到一个未知样品时，就必须了解的来源，从而估计样品可能含有的组分，以及样品

的沸点范围。如能确认样品可直接分析。如果样品中有不能用GC直接分析的组分，或样品

浓度太低，就必须进行必要的预处理，包括采用一些预分离手段，如各种萃取技术、浓缩和

稀释方法、提纯方法等。

2、确定仪器配置

所谓仪器配置就是用于分析样品的方法采用什么进样装置、什么载气、什么色谱柱以及什么

检测器。

3、确定初始操作条件

当样品准备好，且仪器配置确定之后，就可开始进行尝试性分离。这时要确定初始分离条件，

主要包括进样量、进样口温度、检测器温度、色谱柱温度和载气流速。进样量要根据样品浓

度、色谱柱容量和检测器灵敏度来确定。进样口温度主要由样品的沸点范围决定,还要考虑

色谱柱的使用温度。原则上讲，进样口温度高一些有利，一般要接近样品中沸点最高的组分

的沸点，但要低于易分解温度。

4、分离条件优化

分离条件优化目的就是要在最短的分析时间内达到符合要求的分离结果。在改变柱温和载气

流速也达不到基线分离的目的时，就应更换更长的色谱柱，甚至更换不同固定相的色谱柱，

因为在GC中，色谱柱是分离成败的关键。

5、定性鉴定

所谓定性鉴定就是确定色谱峰的归属。对于简单的样品，可通过标准物质对照来定性。就是

在相同的色谱条件下，分别注射标准样品和实际样品，根据保留值即可确定色谱图上哪个峰

是要分析的组分。定性时必须注意，在同一色谱柱上，不同化合物可能有相同的保留值，所

以，对未知样品的定性仅仅用一个保留数据是不够的，双柱或多柱保留指数定性是GC中较

为可靠的方法，因为不同的化合物在不同的色谱柱上具有相同保留值的几率要小得多。

6、定量分析

要确定用什么定量方法来测定待测组分的含量。常用的色谱定量方法不外乎峰面积（峰高）

百分比法、归一化法、内标法、外标法和标准加入法（又叫叠加法）。峰面积（峰高）百分

比法最简单，但最不准确。只有样品由同系物组成、或者只是为了粗略地定量时该法才是可

选择的。相比而言，内标法的定量精度最高，因为它是用相对于标准物（叫内标物）的响应

值来定量的，而内标物要分别加到标准样品和未知样品中，这样就可抵消由于操作条件（包

括进样量）的波动带来的误差。至于标准加入法，是在未知样品中定量加入待测物的标准品，

然后根据峰面积（或峰高）的增加量来进行定量计算。其样品制备过程与内标法类似但计算

原理则完全是来自外标法。标准加入法定量精度应该介于内标法和外标法之间。

7、方法的验证

所谓的方法验证，就是要证明所开发方法的实用性和可靠性。实用性一般指所用仪器配置是

否全部可作为商品购得，样品处理方法是否简单易操作，分析时间是否合理，分析成本是否

可被同行接受等。可靠性则包括定量的线性范围、检测限、方法回收率、重复性、重现性和

准确度等。

内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质

以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。

内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时，在样品中加入一定量的标

准物质，它可被色谱拄所分离，又不受试样中其它组分峰的干扰，只要测定内标物和待测组

分的峰面积与相对响应值，即可求出待测组分在样品中的百分含量。采用内标法定量时，内

标物的选择是一项十分重要的工作。理想地说，内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物，

这样它能以准确、已知的量加到样品中去，它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能

一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应

特征，最好是被分析物质的一个同系物。当然，在色谱分析条什下，内标物必须能与样品中

各组分充分分离。需要指出的是，在少数情况下，分析人员可能比较关心化台物在一个复杂

过程中所得到的回收率，此时，他可以使用一种在这种过程中很容易被完全回收的化台物作

内标，来测定感兴趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所说的选择原则。

在使用内标法定量时，有哪些因素会影响内标和被测组分的峰高或峰面积的比值?

影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的

三类。

由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。

化学方面的因素