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Elisa实验药品步骤及相关材料--第1页
本实验室Elisa所需试剂器材
1.试剂
(1)包被缓冲液碳酸盐缓冲液(PH9.60.05M):
NaCO1.59g
23
NaHCO32.93g
加蒸馏水至1000ml
作用:稀释抗原(菌悬浮液)
(2)洗涤缓冲液PBST(PH7.40.15M):
KHPO0.2g
24
NaHPO·12HO2.9g
242
NaCl8.0g
KCl0.2g
Tween-200.05%0.5ml
加蒸馏水至1000ml
作用:洗涤
(3)缓冲液PBS(PH7.40.15M):
KHPO0.2g
24
NaHPO·12HO2.9g
242
NaCl8.0g
KCl0.2g
加蒸馏水至1000ml
作用:制备封闭液
(4)封闭液:牛血清白蛋白(BSA)0.1g,加缓冲液(PBS)至100ml或PBS加2%BSA
作用:封闭空隙
(5)稀释液:PBST加1%牛血清白蛋白(BSA)
作用:稀释抗体及酶标抗体
(5)HRP羊抗兔IgG一酶标抗体
作用:结合抗体
(6)底物缓冲液磷酸盐柠檬酸(PH5.5):
0.2MNaHPO(28.4g/L)25.7ml
24
0.1M柠檬酸(19.2g/L)24.3ml
蒸馏水50ml
作用:制备TMB
(7)TMB(四甲基联苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml
底物缓冲液(PH5.5)10ml
0.75%HO32μl
22
作用:显色
(8)终止液(2MHSO):蒸馏水178.3ml,逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml
24
作用:终止反应
2.器材:
聚苯乙烯塑料板(酶标板)96孔
Elisa实验药品步骤及相关材料--第1页
Elisa实验药品步骤及相关材料--第2页
抗原制备:
以平板划线法将供试菌菌接种于普通营养琼琼脂培
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