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【报告】培养基制备实验报告--第1页

培养基制备实验报告

篇一:培养基的制备与灭菌实验报告

陕西师范大学远程教育学院

生物学实验报告

报告题目培养基的制备与灭菌

姓名刘伟

学号

专业生物科学

批次/层次

指导教师

学习中心

培养基的制备与灭菌

一、目的要求

1.掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。

2.掌握培养基的配置原则和方法。

3.掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。

二、基本原理

牛肉膏蛋白胨培养基:

是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。由于这种培养

基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供细菌生长繁殖之用。

高压蒸汽灭菌:

主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。将灭菌的物品放在一个密闭

和加压的灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。待蒸汽将锅内冷空气从排气

阀中趋尽,关闭排气阀继续加热。此时蒸汽不溢出,压力增大,沸点升高,获得高于100℃

的温度导致菌体蛋白凝固变性,而达到灭菌的目的。

三、实验材料

1.药品:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol/L的NaOH和HCl溶液。

2.仪器及玻璃器皿:天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三

角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。

3.其他物品:药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花等。

四、操作步骤

(一)玻璃器皿的洗涤和包装

1.玻璃器皿的洗涤

玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的

水中.用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净。移液管先用含有洗涤剂的水浸泡,再用自

【报告】培养基制备实验报告--第1页

【报告】培养基制备实验报告--第2页

2.灭菌前玻璃器皿的包装

(1)培养皿的包扎:培养皿由一盖一底组成一套,可用报纸将几套培养皿包

成一包,或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌。包装后的培养皿须

经灭菌之后才能使用。

(2)移液管的包扎:在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉),它的作

用是避免外界及口中杂菌进入管内,并防止菌液等吸入口中。塞入此小段棉花应距管口

约0.5cm左右,棉花自身长度约1~1.5cm。塞棉花时.可用一外围拉直的曲别针、将少许棉

花塞入管口内。棉花要塞得松紧适宜,吹时以能通气而又不使棉花滑下为准。

先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条,然后将已塞好棉花的移液管尖端

放在长条报纸的一端,约成45℃角,折叠纸条包住尖端,用左手握住移液管身,有手将

移液管压紧.在桌面上向前搓转,以螺旋式包扎起来。上端剩余纸条,折叠打结,准备灭菌。

(二)液体及固体培养基的配制过程

1.液体培养基配制

(1)称量(假定配制1000ml培养基)

按培养基配方比例依次准确地称取3.0g牛肉膏、10.0g蛋白胨、5.0gNaCl放入烧杯(或

1000ml刻度搪瓷杯)中.牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化

后倒入烧杯。

(2)溶化

在上述烧杯中先加入少于所需要的水量(如约700ml),用玻棒搅匀,然后,在石棉网

上加热使其溶解,将药品完全溶解后,补充水到所需的总体积(1000ml);

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